細(xì)胞簡介：

大鼠成骨分離自顱骨組織；顱骨位于脊柱上方，由23塊形狀和大小不同的扁骨和不規(guī)則骨組成。除下頜骨及舌骨外，其余各骨彼此借縫或軟骨牢固連結(jié)，起著保護和支持腦、感覺器官以及消化器和呼吸器的起始部分的作用。顱分腦顱和面顱兩部分。腦顱位于顱的后上部，內(nèi)有顱腔，容納腦，共8塊。面顱為顱的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等結(jié)構(gòu)，構(gòu)成面部的支架，共15塊。成骨細(xì)胞是骨形成的主要功能細(xì)胞，負(fù)責(zé)骨基質(zhì)的合成、分泌和礦化。骨不斷地進行著重建，骨重建過程包括破骨細(xì)胞貼附在舊骨區(qū)域，分泌酸性物質(zhì)溶解礦物質(zhì)，分泌蛋白酶消化骨基質(zhì)，形成骨吸收陷窩；其后，成骨細(xì)胞移行至被吸收部位，分泌骨基質(zhì)，骨基質(zhì)礦化而形成新骨；破骨與成骨過程的平衡是維持正常骨量的關(guān)鍵。成骨細(xì)胞培養(yǎng)不僅有助于了解骨形成機制、骨骼系統(tǒng)疾病的分子和細(xì)胞學(xué)基礎(chǔ)，也是藥物篩選、生物材料開發(fā)和生物工程研究的重要手段。

產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 大鼠成骨細(xì)胞

組織來源 顱骨組織

默認(rèn)種屬 大鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介 公司實驗室分離的大鼠成骨采用先用短時間消化、后用膠原酶反復(fù)消化制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的大鼠成骨經(jīng)ALP染色檢測，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠成骨細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)步驟：

1. 細(xì)胞復(fù)蘇

運輸與接收：細(xì)胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細(xì)胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。

復(fù)蘇操作：將細(xì)胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。

2. 細(xì)胞傳代

傳代時機：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%匯合度時進行傳代。

操作步驟：

棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落。

加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞完全脫落。

離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。

按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。

換液頻率：每2-3天換液一次。

3. 細(xì)胞凍存

凍存液：使用無血清凍存液。

凍存步驟：細(xì)胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

使用細(xì)胞進行實驗，請注意以下幾點：

代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進行實驗，以防止因傳代過多導(dǎo)致的遺傳漂移或功能衰退。

操作輕柔：原代細(xì)胞對環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時需格外小心，避免機械損傷。

營養(yǎng)需求：它們往往需要更復(fù)雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。