細胞簡介：

小鼠腹腔巨噬分離自腹腔；腹腔，即軀干腹部的腔，內(nèi)襯腹膜，由體壁、橫膈膜和盆底圍成，其內(nèi)容納胃、肝、膽囊、脾臟、胰、腎臟、腸、闌尾、膀胱、泌尿系和婦科(子宮、附件)等其他內(nèi)臟器官。巨噬細胞屬免疫細胞，有多種功能，是研究細胞吞噬、細胞免疫和分子免疫學的重要對象。巨噬細胞較易獲得，便于培養(yǎng)，并可進行純化。巨噬細胞屬不繁殖細胞群，在條件適宜下可生活2-3周，多用做原代培養(yǎng)，難以長期生存。巨噬細胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球，源自單核細胞，而單核細胞又來源于骨髓中的前體細胞。巨噬細胞和單核細胞皆為吞噬細胞，在脊椎動物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細胞免疫)。它們的主要功能是以固定細胞或游離細胞的形式對細胞殘片及病原體進行噬菌作用(即吞噬以及消化)，并激活淋巴球或其他免疫細胞，令其對病原體作出反應。巨噬細胞功能及其在疾病發(fā)生過程中的作用是目前研究的熱點問題之一；腹腔巨噬細胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。

產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠腹腔巨噬細胞

組織來源 腹腔液

默認種屬 小鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介 公司實驗室分離的小鼠腹腔巨噬采用反復往腹腔注射培養(yǎng)基并抽取的方法結(jié)合差速貼壁制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的小鼠腹腔巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 巨噬細胞樣

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 （12mM）

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠腹腔巨噬細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)步驟：

1. 細胞復蘇

運輸與接收：細胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。

復蘇操作：將細胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。

2. 細胞傳代

傳代時機：當細胞密度達80%匯合度時進行傳代。

操作步驟：

棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落。

加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細胞完全脫落。

離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。

按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。

換液頻率：每2-3天換液一次。

3. 細胞凍存

凍存液：使用無血清凍存液。

凍存步驟：細胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

使用細胞進行實驗，請注意以下幾點：

代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進行實驗，以防止因傳代過多導致的遺傳漂移或功能衰退。

操作輕柔：原代細胞對環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時需格外小心，避免機械損傷。

營養(yǎng)需求：它們往往需要更復雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。