極小棒桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 極小棒桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Corynebacterium minutissimum Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4502 |
檢測原理
基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，通過特異性引物擴(kuò)增極小棒桿菌保守基因區(qū)域，SYBR Green染料嵌入雙鏈DNA后釋放熒光信號，實(shí)時監(jiān)測擴(kuò)增進(jìn)程。
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用：用戶僅需提供待測DNA模板。
高特異性：引物設(shè)計針對極小棒桿菌保守序列，避免交叉反應(yīng)。
閉管操作：一管式反應(yīng)體系降低交叉污染風(fēng)險。
內(nèi)置對照：提供陽性對照以排除假陰性結(jié)果。
操作流程
1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
分區(qū)操作：嚴(yán)格區(qū)分試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)，各區(qū)使用獨(dú)立耗材（建議使用帶濾芯吸頭）。
樣本處理：在生物安全柜中操作，保持0-4℃環(huán)境以避免核酸降解。
2. 反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| 2×qPCR預(yù)混液 | 10 |
| 染料法qPCR引物混合液 | 2 |
| 模板DNA | 6 |
| 超純水 | 2 |
注：
陽性對照需單獨(dú)配制，避免污染其他組分。
若使用ABI 7500/7700/7900儀器，需添加2μL 10×ROX染料；其他儀器以超純水替代。
3. PCR擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 3分鐘（1個循環(huán)）。
擴(kuò)增：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40個循環(huán)，熒光信號采集）。
注意事項
質(zhì)量控制：每批次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陰性對照（超純水）和陽性對照。
試劑處理：使用前充分融化混勻并瞬時離心，避免反復(fù)凍融。
污染防控：操作陽性對照時需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)后對工作臺進(jìn)行紫外線消毒。
適用范圍：本試劑盒僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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