細胞簡介：

小鼠破骨分離自骨組織和骨髓；破骨細胞是骨組織中的多核巨細胞，位于骨組織表面的淺凹處。目前一般認為破骨細胞是分離自骨骼外的造血系統(tǒng)，其前體可能屬于造血干細胞的前單核細胞。破骨細胞的主要功能是維持骨吸收和骨形成的相對平衡，若失去這種平衡則發(fā)生病理性變化。因此多數(shù)學者從破骨細胞著手研究破骨細胞的結(jié)構(gòu)、功能探討骨吸收，形成相互平衡的機制。但破骨細胞是一種終末分化細胞，屬于不增殖細胞群，不能增殖和傳代，只能進行原代培養(yǎng)且存活時間較短。

產(chǎn)品信息:

產(chǎn)品名稱 小鼠破骨細胞

組織來源 骨髓

默認種屬 小鼠

產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25

方法簡介 公司實驗室分離的小鼠破骨采用機械分離法/密度梯度離心法和骨髓單核細胞誘導法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的小鼠破骨經(jīng)TRAP染色檢測，純度可達30%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 多核巨細胞

傳代特性 屬于終末分化細胞；屬于不增殖細胞群

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

小鼠破骨細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細胞培養(yǎng)步驟：

1. 細胞復蘇

運輸與接收：細胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。

復蘇操作：將細胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。

2. 細胞傳代

傳代時機：當細胞密度達80%匯合度時進行傳代。

操作步驟：

棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細胞1-2次。

加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落。

加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細胞完全脫落。

離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。

按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。

換液頻率：每2-3天換液一次。

3. 細胞凍存

凍存液：使用無血清凍存液。

凍存步驟：細胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

使用細胞進行實驗，請注意以下幾點：

代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進行實驗，以防止因傳代過多導致的遺傳漂移或功能衰退。

操作輕柔：原代細胞對環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時需格外小心，避免機械損傷。

營養(yǎng)需求：它們往往需要更復雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。