乳突類圓線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 乳突類圓線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Strongyloides papillosus Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4594 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒采用染料法熒光定量PCR技術(shù)，專用于乳突類圓線蟲（Strongyloides stercoralis）DNA的定性與定量檢測。通過優(yōu)化引物和探針設(shè)計，確保高靈敏度和特異性，適用于科研用途。
試劑盒組成
PCR預(yù)混液：含Taq DNA聚合酶、dNTPs、緩沖液及熒光染料（如SYBR Green），50次反應(yīng)（20μL/次）。
陽性對照：凍干品，濃度為1×10^8拷貝/μL，需用配套稀釋液復(fù)溶。
陰性對照：無DNA模板的緩沖液。
標準品系列：預(yù)稀釋的梯度標準品（1×10^7至1×10^2拷貝/μL），用于建立標準曲線。
DNA提取輔助試劑（可選）：與常見核酸純化方法兼容。
操作步驟
標準曲線制備
標記6管離心管（7至2號），每管加入45μL專用稀釋液。
取5μL陽性對照（1×10^8拷貝/μL）加入7號管，震蕩混勻得1×10^7拷貝/μL標準品，依次稀釋至1×10^2拷貝/μL（梯度稀釋法）。
樣本DNA制備
使用商業(yè)核酸提取試劑盒或自選方法純化樣本DNA。
設(shè)立陰性對照（無模板）和陽性對照（試劑盒提供）。
qPCR反應(yīng)體系
反應(yīng)體系（20μL）：
預(yù)混液10μL
引物探針混合液2μL
模板DNA 2μL
無核酸酶水補至20μL
擴增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
注意事項
加樣順序：建議先加陰性對照、待測樣本，最后加陽性對照，避免交叉污染。
保存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
適用范圍：僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
質(zhì)量控制：若標準曲線R2值＜0.98或擴增效率超出90%~110%，需重復(fù)實驗。
性能參數(shù)
靈敏度：最低檢測限為10拷貝/μL。
特異性：不與常見寄生蟲DNA發(fā)生交叉反應(yīng)。
線性范圍：1×10^2~1×10^7拷貝/μL（定量檢測）。
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關(guān)鍵字： 乳突類圓線蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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