細(xì)胞簡介：
喉為氣管前段的膨大部分，既是呼吸的通道，也是發(fā)音器官。喉由軟骨、韌帶、肌肉與粘膜構(gòu)成，其中粘膜上皮是粘膜層的重要組成部分。
產(chǎn)品名稱 | 人喉黏膜上皮細(xì)胞 | 組織來源 | 喉黏膜組織 |
英文名稱 | Primary human laryngeal mucosal epithelial cells | 產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
貨號 | XG-X4691 | 生長特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品信息:
產(chǎn)品名稱 人喉黏膜上皮細(xì)胞
組織來源 喉黏膜組織
默認(rèn)種屬 人
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
細(xì)胞特性
1）細(xì)胞來源于術(shù)后的喉黏膜組織。
2)細(xì)胞鑒定：廣譜角蛋白（PCK）熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，多角形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
我們推薦使用 delf 原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
原代細(xì)胞培養(yǎng)（Primary Culture）是指從機(jī)體中直接取出組織或器官，通過酶消化或機(jī)械方法分散成單個(gè)細(xì)胞或組織塊，
在體外模擬體內(nèi)環(huán)境進(jìn)行首次培養(yǎng)的過程。由于原代細(xì)胞剛從活體組織分離，其生物學(xué)特性、
遺傳背景和功能狀態(tài)最接近體內(nèi)真實(shí)情況，因此在藥物篩選、毒理學(xué)研究、疾病機(jī)制探索和病毒學(xué)等領(lǐng)域具有不可替代的價(jià)值。
核心特點(diǎn)
高度生理相關(guān)性：保留了體內(nèi)來源組織的結(jié)構(gòu)、功能和基因表達(dá)特征。
有限壽命：與無限增殖的腫瘤細(xì)胞系不同，原代細(xì)胞增殖能力有限，經(jīng)過一定次數(shù)的分裂后會(huì)進(jìn)入衰老期，這更符合正常細(xì)胞的生理狀態(tài)。
異質(zhì)性：初始培養(yǎng)物通常是多種細(xì)胞類型的混合物，有時(shí)需要通過差速貼壁等方法進(jìn)行純化。
操作要求高：對培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無菌操作的要求極為嚴(yán)格，培養(yǎng)難度大于永生化細(xì)胞系。
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細(xì)胞培養(yǎng)步驟：
1. 細(xì)胞復(fù)蘇
運(yùn)輸與接收：細(xì)胞以液氮凍存形式運(yùn)輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細(xì)胞瓶，置于超凈臺內(nèi)無菌操作。
復(fù)蘇操作：將細(xì)胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。
2. 細(xì)胞傳代
傳代時(shí)機(jī)：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%匯合度時(shí)進(jìn)行傳代。
操作步驟：
棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細(xì)胞完全脫落。
離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個(gè)T25瓶），補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率：每2-3天換液一次。
3. 細(xì)胞凍存
凍存液：使用無血清凍存液。
凍存步驟：細(xì)胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-86℃，最終轉(zhuǎn)入液氮長期保存。
關(guān)鍵字： 人喉黏膜;上皮細(xì)胞;
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