該試劑盒采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗ATP1α1單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品與樣品中的ATP1α1與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗ATP1α1抗體，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入酶底物TMB，出現(xiàn)藍(lán)色，加終止液硫酸，顏色變黃，在450nm處測(cè)OD值，ATP1α1濃度與OD值成正比，可通過(guò)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)求出標(biāo)本中ATP1α1濃度。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠Na-K-ATP酶α1(ATP1α1)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱(chēng) | RatATP1α1 elisa kit | 貨號(hào) | PR10441 |
檢測(cè)范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù)：
以下數(shù)據(jù)和曲線(xiàn)僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標(biāo)曲：
核心參數(shù)：
檢測(cè)原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應(yīng)性：大鼠
檢測(cè)時(shí)間：1.5-2.5h
保存條件：2-8℃避光冷藏
特異性：僅識(shí)別大鼠 ATP1α1，無(wú)交叉反應(yīng)
板內(nèi)變異系數(shù)：＜8%
樣本處理指南:
血清樣本
全血標(biāo)本室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)夜
1000×g離心20分鐘，取上清液檢測(cè)
暫不檢測(cè)的樣本按單次用量分裝，-20℃/-80℃凍存，避免反復(fù)凍融
血漿樣本
采用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本
采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃環(huán)境下1000×g離心15分鐘
取上清液檢測(cè)，避免使用溶血、高血脂樣本
組織勻漿樣本
預(yù)冷PBS（0.01M，pH=7.4）沖洗組織，去除殘留血液
按1:9重量體積比加入PBS（1g組織對(duì)應(yīng)9mL PBS），可添加蛋白酶抑制劑
冰上充分研磨或超聲破碎，5000×g離心5-10分鐘
取上清液檢測(cè)
細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本
1000×g離心20分鐘，去除細(xì)胞碎片
取上清液檢測(cè)，避免使用含NaN3的樣本（會(huì)抑制HRP酶活性）
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關(guān)鍵字： 大鼠Na-K-ATP酶α1;ATP1α1;elisa試劑盒;
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