運用雙抗體夾心法。包被抗大鼠NFATC3抗體于酶標板，樣本和標準品中的NFATC3與包被抗體結合，然后加入生物素化的抗大鼠NFATC3抗體，形成免疫復合物，再加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素，與生物素結合，加入TMB底物顯色，顏色深淺與NFATC3含量成正比，通過酶標儀讀數(shù)和標準曲線計算樣本中NFATC3的濃度。
產品名稱
大鼠T-細胞核因子3(NFATC3)elisa試劑盒
靈敏度
0.078125ng/mL
英文名稱
RatNFATC3 elisa kit
貨號
PR8541
檢測范圍
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夾心法數(shù)據：
以下數(shù)據和曲線僅供參考，實驗者需根據自己的實驗數(shù)據建立標準曲線。
夾心法標曲：
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應性：大鼠
檢測時間：1.5-2.5h
保存條件：2-8℃避光冷藏
特異性：無交叉免疫反應
板內變異系數(shù)：＜8%操作步驟:
?試劑準備?：所有試劑恢復至室溫（18–25℃），洗滌液如有結晶需加熱溶解；
?標準品配制?：將凍干標準品用1mL標準品稀釋液溶解，得2000 pg/mL原液，再倍比稀釋成7個濃度梯度，另設空白孔（僅稀釋液）；
?加樣?：每孔加入50μL樣本或標準品，37℃孵育30–60分鐘；
?洗板?：棄去孔內液體，用1×洗滌液洗板5次，拍干；
?加酶標抗體?：每孔加入100μL檢測抗體-HRP，37℃孵育1小時；
?洗板?：同上；
?顯色?：每孔加入50μL底物A + 50μL底物B，37℃避光孵育10–30分鐘；
?終止?：每孔加入50μL終止液，顏色由藍變黃；
?讀數(shù)?：在450 nm波長下用酶標儀測定OD值，根據標準曲線計算樣本濃度。
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上海博湖生物科技有限公司
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