采用雙抗體夾心法。將抗大鼠XBP1抗體包被在酶標板上,樣本和標準品中的XBP1與包被抗體結合,接著加入生物素化的抗大鼠XBP1抗體,形成免疫復合物,再加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素,與生物素結合,加入TMB底物顯色,根據(jù)OD值與標準曲線,得出樣本中XBP1的濃度。
產品名稱
大鼠X框結合蛋白(XBP1)elisa試劑盒
靈敏度
0.078125ng/mL
英文名稱
RatXBP1 elisa kit
貨號
PR7257
檢測范圍
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夾心法數(shù)據(jù):
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
夾心法標曲:
核心參數(shù):
檢測原理:雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應性:大鼠
檢測時間:1.5-2.5h
保存條件:2-8℃避光冷藏
特異性:特異性識別大鼠 XBP1
板內變異系數(shù):<8%操作流程:
加樣
設置標準品孔、樣本孔和空白孔:標準品孔加入不同濃度的標準品50μL;樣本孔先加樣本稀釋液40μL,再加待測樣本10μL(樣本最終稀釋5倍,結果需乘以5);空白孔不加任何液體
溫育
除空白孔外,每孔加入HRP標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃溫育60分鐘
洗板
棄去孔內液體,在吸水紙上拍干;每孔加滿洗滌液,靜置1分鐘后棄去,重復洗板5次;最后一次洗板后需將孔內液體徹底拍干
顯色
每孔加入底物液A、B各50μL,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘
終止反應
每孔加入終止液50μL,此時藍色會立即轉為黃色
讀數(shù)
以空白孔調零,15分鐘內用酶標儀測定450nm波長下各孔的吸光度(OD值)
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上海博湖生物科技有限公司
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