基于雙抗體夾心法。包被抗大鼠β-Hex抗體于酶標(biāo)板，樣本和標(biāo)準(zhǔn)品中的β-Hex與包被抗體結(jié)合，然后加入生物素化的抗大鼠β-Hex抗體，形成免疫復(fù)合物，再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素，與生物素結(jié)合，加入TMB底物顯色，顏色深淺與β-Hex含量成正比，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中β-Hex的濃度。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠β-己糖胺酶(β-Hex)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱 | Ratβ-Hex elisa kit | 貨號 | PR7172 |
檢測范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù)：
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標(biāo)曲：
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應(yīng)性：大鼠
檢測時間：1.5-2.5h
保存條件：2-8℃避光冷藏
特異性：特異性結(jié)合大鼠 β-Hex
板內(nèi)變異系數(shù)：＜8%
樣本處理與保存方法:
不同樣本的處理方式有所差異，處理后需確保樣本清澈無沉淀，避免溶血或高血脂樣本影響結(jié)果：
血清樣本
全血標(biāo)本室溫放置2小時或4℃過夜，1000×g離心20分鐘，取上清液檢測
短期保存（1周內(nèi)）可置于4℃，長期保存需分裝后-20℃/-80℃凍存，避免反復(fù)凍融
血漿樣本
選擇EDTA或肝素作為抗凝劑，采血后30分鐘內(nèi)于2-8℃環(huán)境1000×g離心15分鐘，取上清液
保存條件同血清樣本
組織勻漿樣本
用預(yù)冷的PBS（0.01M，pH=7.4）沖洗組織，去除殘留血液，稱重后剪碎
按1:9的重量體積比加入PBS（如1g組織加9mL PBS，可添加蛋白酶抑制劑），冰上充分研磨或超聲破碎
5000×g離心5-10分鐘，取上清液檢測；未使用的樣本分裝后凍存
細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本
1000×g離心20分鐘，去除細(xì)胞碎片及雜質(zhì)，取上清液檢測
若檢測細(xì)胞內(nèi)成分，需用PBS稀釋細(xì)胞懸液至濃度約100萬/mL，反復(fù)凍融裂解細(xì)胞后離心取上清
尿液樣本
無菌管收集尿液，2000-3000轉(zhuǎn)/分離心20分鐘，取上清液檢測；若有沉淀需再次離心
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關(guān)鍵字： 大鼠β-己糖胺酶;β-Hex;elisa試劑盒;
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