采用雙抗體夾心ELISA法。用抗大鼠CNR1抗體包被酶標(biāo)板,樣本中的CNR1與包被抗體結(jié)合后,加入生物素化的抗CNR1抗體,形成免疫復(fù)合物,再結(jié)合辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的親和素。加入TMB底物顯色,通過(guò)OD值與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照,得出樣本中CNR1的含量。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠大麻素1受體(CNR1)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱 | RatCNR1 elisa kit | 貨號(hào) | PR10061 |
檢測(cè)范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù):
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標(biāo)曲:
核心參數(shù):
檢測(cè)原理:雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應(yīng)性:大鼠
檢測(cè)時(shí)間:1.5-2.5h
保存條件:2-8℃避光冷藏
特異性:專一靶向大鼠 CNR1 受體
板內(nèi)變異系數(shù):<8%
試劑準(zhǔn)備:
平衡:所有試劑回溫至室溫(20–25℃)。
洗滌液(1×):30 mL 25× 濃縮洗液 + 720 mL 去離子水,混勻,2–8℃可存 1 個(gè)月。
標(biāo)準(zhǔn)品稀釋:
每瓶標(biāo)準(zhǔn)品加1 mL稀釋液,靜置 15 min,輕柔混勻(避免氣泡),得最高濃度 S7。
準(zhǔn)備 7 個(gè) EP 管,各加250 μL稀釋液,倍比稀釋:
S7:原液(如 160 μg/L)
S6:250 μL S7 + 250 μL 稀釋液
S5 至 S1 依次稀釋
S0:稀釋液(空白對(duì)照)
生物素化抗體(1×):按 1:100 稀釋(如 12 μL 100× 濃縮 + 1.2 mL 稀釋液),現(xiàn)配現(xiàn)用。
SAV?HRP(1×):按 1:100 稀釋,現(xiàn)配現(xiàn)用,避光。
常見(jiàn)問(wèn)題
高背景:洗板不足、SAV?HRP 濃度過(guò)高、孵育溫度過(guò)高 / 時(shí)間過(guò)長(zhǎng)、污染。
標(biāo)準(zhǔn)曲線線性差:標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤、孵育時(shí)間不準(zhǔn)、讀數(shù)超時(shí)。
樣品值偏低:樣品降解、稀釋倍數(shù)過(guò)高、加樣誤差。
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關(guān)鍵字: 大鼠大麻素1受體;CNR1;elisa試劑盒;
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