采用雙抗體夾心ELISA法。將抗大鼠VDAC1抗體包被于酶標(biāo)板，樣本中的VDAC1與包被抗體結(jié)合，然后加入生物素化的抗VDAC1抗體，形成復(fù)合物，再結(jié)合辣根過氧化物酶標(biāo)記的親和素。加入TMB顯色，通過OD值和標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中VDAC1的濃度。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠電壓依賴性陰離子通道蛋白1(VDAC1)elisa試劑盒 | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
英文名稱 | RatVDAC1 elisa kit | 貨號 | PR7311 |
檢測范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 品牌 | 派瑞曼 |
夾心法數(shù)據(jù)：
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000 |
夾心法標(biāo)曲：
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應(yīng)性：大鼠
檢測時間：1.5-2.5h
保存條件：2-8℃避光冷藏
特異性：精準(zhǔn)識別大鼠 VDAC1
板內(nèi)變異系數(shù)：＜8%
操作流程:
加樣
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔和空白孔：標(biāo)準(zhǔn)品孔加入不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；樣本孔先加樣本稀釋液40μL，再加待測樣本10μL（樣本最終稀釋5倍，結(jié)果需乘以5）；空白孔不加任何液體
溫育
除空白孔外，每孔加入HRP標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃溫育60分鐘
洗板
棄去孔內(nèi)液體，在吸水紙上拍干；每孔加滿洗滌液，靜置1分鐘后棄去，重復(fù)洗板5次；最后一次洗板后需將孔內(nèi)液體徹底拍干
顯色
每孔加入底物液A、B各50μL，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘
終止反應(yīng)
每孔加入終止液50μL，此時藍色會立即轉(zhuǎn)為黃色
讀數(shù)
以空白孔調(diào)零，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀測定450nm波長下各孔的吸光度（OD值）
公司正在出售的產(chǎn)品：
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關(guān)鍵字： 大鼠電壓依賴性陰離子通道蛋白1;VDAC1;elisa試劑盒;
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