采用雙抗體夾心法。將抗大鼠CK2α抗體包被在酶標板上,樣本和標準品中的CK2α與包被抗體結合,接著加入生物素化的抗大鼠CK2α抗體,形成免疫復合物,再加入辣根過氧化物酶標記的鏈霉親和素,與生物素結合,加入TMB底物顯色,根據(jù)OD值與標準曲線,確定樣本中CK2α的濃度。
產品名稱
大鼠酪蛋白激酶2α(CK2α)elisa試劑盒
靈敏度
0.078125ng/mL
英文名稱
RatCK2α elisa kit
貨號
PR10091
檢測范圍
0.15625ng/mL-10ng/mL
品牌
派瑞曼
夾心法數(shù)據(jù):
以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考,實驗者需根據(jù)自己的實驗數(shù)據(jù)建立標準曲線。
夾心法標曲:
核心參數(shù):
原理:雙抗體夾心法 ELISA
種屬:大鼠特異性
樣本:血清、血漿、細胞上清、組織勻漿
時長:3-4h
保存:2-8℃避光冷藏
特異性:高特異識別大鼠 CK2α
板內 CV:<8%
樣本處理指南:
血清樣本
全血標本室溫放置2小時或4℃過夜
1000×g離心20分鐘,取上清液檢測
暫不檢測的樣本按單次用量分裝,-20℃/-80℃凍存,避免反復凍融
血漿樣本
采用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本
采集后30分鐘內于2-8℃環(huán)境下1000×g離心15分鐘
取上清液檢測,避免使用溶血、高血脂樣本
組織勻漿樣本
預冷PBS(0.01M,pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液
按1:9重量體積比加入PBS(1g組織對應9mL PBS),可添加蛋白酶抑制劑
冰上充分研磨或超聲破碎,5000×g離心5-10分鐘
取上清液檢測
細胞培養(yǎng)上清樣本
1000×g離心20分鐘,去除細胞碎片
取上清液檢測,避免使用含NaN3的樣本(會抑制HRP酶活性)
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