運(yùn)用雙抗體夾心法。包被抗大鼠RELN抗體于酶標(biāo)板，樣本和標(biāo)準(zhǔn)品中的RELN與包被抗體結(jié)合，然后加入生物素化的抗大鼠RELN抗體，形成免疫復(fù)合物，再加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的鏈霉親和素，與生物素結(jié)合，加入TMB底物顯色，顏色深淺與RELN含量成正比，通過酶標(biāo)儀讀數(shù)和標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣本中RELN的濃度。

夾心法數(shù)據(jù)：

以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗者需根據(jù)自己的實(shí)驗數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

夾心法標(biāo)曲：

核心參數(shù)：

原理：雙抗體夾心法 ELISA

種屬：大鼠特異性

樣本：血清、血漿、細(xì)胞上清、腦組織勻漿

時長：3-4h

保存：2-8℃避光冷藏

特異性：特異檢測大鼠 RELN

板內(nèi) CV：＜8%

樣本處理指南:

血清樣本

全血標(biāo)本室溫放置2小時或4℃過夜

1000×g離心20分鐘，取上清液檢測

暫不檢測的樣本按單次用量分裝，-20℃/-80℃凍存，避免反復(fù)凍融

血漿樣本

采用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本

采集后30分鐘內(nèi)于2-8℃環(huán)境下1000×g離心15分鐘

取上清液檢測，避免使用溶血、高血脂樣本

組織勻漿樣本

預(yù)冷PBS（0.01M，pH=7.4）沖洗組織，去除殘留血液

按1:9重量體積比加入PBS（1g組織對應(yīng)9mL PBS），可添加蛋白酶抑制劑

冰上充分研磨或超聲破碎，5000×g離心5-10分鐘

取上清液檢測

細(xì)胞培養(yǎng)上清樣本

1000×g離心20分鐘，去除細(xì)胞碎片

取上清液檢測，避免使用含NaN3的樣本（會抑制HRP酶活性）

公司正在出售的產(chǎn)品：