大鼠Kelch樣ECH相關(guān)蛋白1(KEAP1)elisa試劑盒
商品屬性：
英文名稱 | RatKEAP1 elisa kit | 靈敏度 | 0.078125ng/mL |
檢測范圍 | 0.15625ng/mL-10ng/mL | 貨號(hào) | PR8935 |
核心參數(shù)：
檢測原理：雙抗體夾心法 ELISA
種屬反應(yīng)性：僅特異性識(shí)別大鼠 KEAP1
檢測時(shí)間：3.5~4h
保存條件：2~8℃冷藏，嚴(yán)禁冷凍，開封板條密封 2~8℃存放
特異性：特異結(jié)合大鼠 KEAP1，Kelch 家族蛋白無交叉反應(yīng)
板內(nèi)變異系數(shù)：＜8%；板間變異系數(shù)：＜10%
夾心法數(shù)據(jù)：
| 校準(zhǔn)品濃度(ng/mL) | 10.00 | 5.00 | 2.50 | 1.25 | 0.63 | 0.31 | 0.16 | 0.00 |
| OD450/630值 | 2.691 | 1.552 | 0.828 | 0.488 | 0.355 | 0.173 | 0.097 | 0.030 |
| 校正OD值 | 2.660 | 1.521 | 0.798 | 0.458 | 0.325 | 0.142 | 0.067 | 0.000
|
夾心法標(biāo)曲：
產(chǎn)品定義：
用于定量檢測大鼠樣本中KEAP1蛋白的含量，KEAP1是Nrf2信號(hào)通路的負(fù)調(diào)控因子，通過結(jié)合Nrf2促進(jìn)其降解，當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激時(shí)，KEAP1與Nrf2解離，Nrf2進(jìn)入細(xì)胞核激活抗氧化基因表達(dá)，其表達(dá)異常與氧化應(yīng)激相關(guān)疾病、腫瘤的研究相關(guān)。
核心流程:
1. 實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備
試劑盒組分、自備器材提前平衡至室溫（20-25℃）
濃縮洗滌液稀釋至工作濃度，試劑輕輕混勻避免氣泡
2. 加樣孵育
設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣本孔、空白孔，按要求加入標(biāo)準(zhǔn)品/樣本
加入標(biāo)記抗體后，封板膜密封，37℃溫育60分鐘
3. 洗板
棄液后拍干，每孔加滿洗滌液靜置1分鐘，重復(fù)洗板5次
最后一次洗板后徹底拍干孔內(nèi)液體，避免殘留影響結(jié)果
4. 顯色終止
每孔加入底物液A、B各50μL，37℃避光顯色15分鐘
加入終止液，藍(lán)色立即轉(zhuǎn)為黃色
5. 讀數(shù)計(jì)算
空白孔調(diào)零，15分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀讀取450nm波長OD值
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本中目標(biāo)物質(zhì)的濃度
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