1.產(chǎn)品名稱:人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞
2.組織來源:腦組織
3.產(chǎn)品規(guī)格:5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介:
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞分離自腦組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(zhì)(灰質(zhì))覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經(jīng)元胞體集中的地方。內(nèi)部則是由神經(jīng)纖維或髓鞘構(gòu)成的白質(zhì)。每一個半球都有三個面,即外側(cè)面(約占整個皮質(zhì)面積的1/3)、內(nèi)側(cè)面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側(cè)面重要的溝、裂有大腦外側(cè)裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質(zhì)組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞,是哺乳動物腦內(nèi)分布最廣泛的一類細胞,也是膠質(zhì)細胞中體積最大的一種。用經(jīng)典的金屬浸鍍技術(shù)(銀染色)顯示此類膠質(zhì)細胞呈星形,從胞體發(fā)出許多長而分支的突起,伸展充填在神經(jīng)細胞的胞體及其突起之間,起支持和分隔神經(jīng)細胞的作用。細胞突起的末端常膨大形成腳板或稱終足,有些腳板貼附在鄰近的毛細血管壁上,因此這些腳板又被稱為血管足或血管周足,靠近腦脊髓表面的腳板則附著在軟膜內(nèi)表面,彼此連接構(gòu)成膠質(zhì)界膜。細胞剛分離時呈圓形,24h后大部分細胞貼壁,均勻分布于瓶底,部分細胞伸出細小突起,培養(yǎng)4-5d后細胞數(shù)量明顯增多,呈扁平、多角形,胞質(zhì)豐富且核漿較少,細胞核呈橢圓形,偏于胞體一側(cè)。神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的重要細胞組成,不僅具有支持功能,還能夠合成及分泌多種神經(jīng)活性物質(zhì),在維持神經(jīng)元內(nèi)外環(huán)境、生存、遷移、免疫調(diào)節(jié)、信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、軸突生長及功能整合等方面具有重要作用。
本公司生產(chǎn)的神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶;細胞經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息:
DMEM[H]、FBS、膠質(zhì)細胞生長添加劑、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

細胞培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代:如果未超過80%匯合度時,將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中,留5ml完全培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);如果細胞密度超80%,即可進行傳代培養(yǎng)。
貼壁細胞傳代步驟如下:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,使之完全脫落后吸出,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1:2的比例進行分瓶傳代(兩個T25瓶),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代步驟日下:
1、半換液法
半換液處理,豎著培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)箱靜置1小時左右,輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基,然后補給3ml的完全培養(yǎng)基,如果培養(yǎng)基變色慢,可直接加500ul左右FBS,傳代的時候可以直接補給5ml培養(yǎng)基 分兩個培養(yǎng)瓶培養(yǎng),一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次,去掉死細胞。
2、離心換液法
如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm,離心5min,棄去上清,補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
b、細胞凍存:
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細胞一次;
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心 5min;
3、 棄上清,沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液(貨號:C7001),混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可,如后期要將細胞轉(zhuǎn)入液氮罐中,則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉(zhuǎn)入液氮罐中。
C、細胞復(fù)蘇:
1、從液氮中取出細胞凍存管(注意佩戴防護面具),快速將其置入 37℃水浴中解凍, 直至凍存管中無結(jié)晶,然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁;
2、將凍存管中的細胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中,1000rpm離心5min;
3、棄上清,沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸,接種至T25培養(yǎng)瓶,放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
4、第二天,換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞注意事項:有些細胞貼壁不牢,在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落,這是正?,F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管,1000rpm離心5min,收集上清作過渡培養(yǎng)(后期對比培養(yǎng)),沉淀加入胰酶1-2ml,輕輕吹打,重懸,消化1-2分鐘后,加5ml完全培養(yǎng)基終止反應(yīng)。再離心,棄上清,加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代(兩個T25),補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶,最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
關(guān)鍵字: 人神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞;進口原裝原管細胞;ATCC細胞引種;ATCC細胞代購;雅吉細胞庫;
上海雅吉生物科技的核心業(yè)務(wù)主要圍繞生命科學研究所需的各類試劑、細胞、抗體及技術(shù)服務(wù)展開,具體可歸納為以下幾個方面:
細胞產(chǎn)品與技術(shù)平臺:
細胞產(chǎn)品:提供包括正常細胞、腫瘤細胞、腫瘤耐藥細胞在內(nèi)的多種細胞系。同時,公司也是美國ScienCell等品牌的原代細胞產(chǎn)品的代理商。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株構(gòu)建服務(wù):公司具備豐富的蛋白表達研究經(jīng)驗,能夠為客戶提供從基因序列到穩(wěn)定細胞株交付的一站式定制服務(wù),應(yīng)用于基因功能研究、藥物篩選和重組蛋白生產(chǎn)等領(lǐng)域。
科研試劑:這是公司的基礎(chǔ)和優(yōu)勢業(yè)務(wù)。產(chǎn)品線全面覆蓋了分子生物學、免疫學、細胞生物學和微生物學等多個學科。
ELISA試劑盒:提供人、大鼠、小鼠、犬、魚、雞、牛等多種物種以及植物的ELISA檢測試劑盒,在國內(nèi)眾多重點實驗室中廣泛使用并被科研文獻引用。生化試劑、抗體與血清:提供包括一抗、二抗、單克隆/多克隆抗體在內(nèi)的多種抗體產(chǎn)品,以及胎牛血清等細胞培養(yǎng)用血清。
蛋白研究相關(guān)試劑盒:提供超過300種針對不同樣本來源(動物、植物、微生物)和不同細胞器(如線粒體、外泌體)的蛋白提取及檢測試劑盒。