1.產品名稱：小鼠淋巴結淋巴細胞
2.組織來源：淋巴結組織
3.產品規(guī)格：5×10^5cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
4.細胞簡介：
小鼠淋巴結淋巴細胞分離自淋巴結；淋巴結是哺乳類特有的周圍淋巴器官，由淋巴細胞集合而成。呈豆形，位于淋巴管行進途中，是產生免疫應答的重要器官之一。淋巴結表面包有被膜，被膜的結締組織伸入淋巴結內形成小梁，構成淋巴結的支架。被膜下為皮質區(qū)，淋巴結的中心及門部為髓質區(qū)。皮質區(qū)有淋巴小結、彌散淋巴組織和皮質淋巴竇（簡稱皮竇），髓質包括由致密淋巴組織構成的髓索和髓質淋巴竇（簡稱髓竇）。淋巴竇的竇腔內有許多淋巴細胞和巨噬細胞，從輸入淋巴管流來的淋巴液先進入皮竇再流向髓竇，最后經輸出淋巴管離開淋巴結。淋巴結的主要功能是濾過淋巴液，產生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應。淋巴結腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過淋巴液，產生淋巴細胞和漿細胞，參與機體的免疫反應；當局部感染時，細菌、病毒或癌細胞等可沿淋巴管侵入，引起局部淋巴結腫大。如該淋巴結不能阻止和消滅它們，則病變可沿淋巴管的流注方向擴散和轉移。淋巴結淋巴細胞是白細胞的一種，由次級淋巴器官淋巴結產生，是機體免疫應答功能的重要細胞成分；細胞為圓形細胞核，細胞質少。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖，繼而發(fā)揮其免疫功能。
本公司生產的小鼠淋巴結淋巴細胞采用勻漿器研磨后通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶；細胞純度可達95%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
5.培養(yǎng)基信息：
RPMI-1640、FBS、淋巴細胞生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
細胞培養(yǎng)步驟
a、細胞傳代：如果未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養(yǎng)液收集至離心管中，留5ml完全培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；如果細胞密度超80%，即可進行傳代培養(yǎng)。
貼壁細胞傳代步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液約1-2ml至培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上完全培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞，使之完全脫落后吸出，然后將懸液轉移至15ml離心管中，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL完全培養(yǎng)基重懸。
4. 將細胞懸液按1：2的比例進行分瓶傳代（兩個T25瓶），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入到37℃、5%CO2的細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
懸浮細胞傳代步驟日下：
1、半換液法
半換液處理，豎著培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)箱靜置1小時左右，輕輕吸掉3ml左右培養(yǎng)基，然后補給3ml的完全培養(yǎng)基，如果培養(yǎng)基變色慢，可直接加500ul左右FBS，傳代的時候可以直接補給5ml培養(yǎng)基 分兩個培養(yǎng)瓶培養(yǎng)，一般這樣傳代3次左右可以離心傳代一次，去掉死細胞。
2、離心換液法
如需分瓶可以將細胞懸液收集到離心管中1000rpm，離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的完全培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。
b、細胞凍存：
1、細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時，棄T25培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細胞一次；
2、添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后加入5ml完全培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打細胞使之脫落，然后將懸液轉移至15ml離心管中，1000rpm離心 5min；
3、 棄上清，沉淀細胞加入1ml的雅吉生物無血清凍存液（貨號：C7001），混勻后加入凍存管中。
4、 將凍存細胞直接放入-80℃冰箱即可，如后期要將細胞轉入液氮罐中，則需在-80℃冰箱 中存放24小時以上再轉入液氮罐中。
C、細胞復蘇：
1、從液氮中取出細胞凍存管（注意佩戴防護面具），快速將其置入 37℃水浴中解凍， 直至凍存管中無結晶，然后用75%的酒精擦拭凍存管外壁；
2、將凍存管中的細胞移至含5ml完全培養(yǎng)基的15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、棄上清，沉淀用5ml完全培養(yǎng)基重懸，接種至T25培養(yǎng)瓶，放于37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4、第二天，換用新鮮完全培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
小鼠淋巴結淋巴細胞（原代）注意事項：有些細胞貼壁不牢，在運輸過程中容易發(fā)生細胞脫落，這是正?，F(xiàn)象。如脫離較多可將培養(yǎng)瓶所有培養(yǎng)液收集至離心管，1000rpm離心5min，收集上清作過渡培養(yǎng)（后期對比培養(yǎng)），沉淀加入胰酶1-2ml，輕輕吹打，重懸，消化1-2分鐘后，加5ml完全培養(yǎng)基終止反應。再離心，棄上清，加1-2ml完全培養(yǎng)基重懸。然后按1:2比例進行分瓶傳代（兩個T25），補充新的完全培養(yǎng)基至5-8ml/瓶，最后放入37℃,5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
關鍵字： 小鼠淋巴結淋巴細胞;進口原裝原管細胞;ATCC細胞引種;ATCC細胞代購;雅吉細胞庫;
上海雅吉生物科技的核心業(yè)務主要圍繞生命科學研究所需的各類試劑、細胞、抗體及技術服務展開，具體可歸納為以下幾個方面：
細胞產品與技術平臺：
細胞產品：提供包括正常細胞、腫瘤細胞、腫瘤耐藥細胞在內的多種細胞系。同時，公司也是美國ScienCell等品牌的原代細胞產品的代理商。
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