活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9抗體
原理特點
該抗體靶向活化型Caspase-9,原理是特異性識別剪切活化后的Caspase-9蛋白抗原位點,Caspase-9是線粒體凋亡通路的起始核心蛋白酶,活化后啟動細胞凋亡級聯(lián)反應。產(chǎn)品特點為特異性識別活化剪切體,不結合未活化的前體蛋白,精準反映線粒體凋亡通路激活水平,靈敏度高,是細胞凋亡機制研究的核心工具抗體。
英文名稱:Caspase-9 Rabbit pAb
中文名稱:活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9抗體

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Caspase-9 subunit p35; Apaf-3; APAF 3; APAF3; Apoptosis related cysteine peptidase; Apoptotic protease activating factor 3; Apoptotic protease MCH 6; Apoptotic protease MCH6; CASP 9; CASP9; Caspase 9; Caspase 9 apoptosis related cysteine protease; Caspase 9 precursor; Caspase 9c; Caspase9; Caspase9 subunit p35; ICE LAP6; ICE like apoptotic protease 6; RNCASP9; MCH 6; MCH6; OTTHUMP00000044594; CASP9_HUMAN.
交叉反應:Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Caspase-9
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號:None
理論分子量:35/50 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
凋亡通路激活:活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9(Cleaved Caspase-9)是Caspase-9的活化形式,作為內(nèi)源性凋亡通路的起始Caspase,激活下游執(zhí)行Caspase(如Caspase-3、Caspase-7),誘導細胞凋亡,清除受損細胞或腫瘤細胞,維持機體穩(wěn)態(tài)。
疾病關聯(lián):Cleaved Caspase-9表達異常與癌癥、神經(jīng)退行性疾病、缺血性疾病等相關;在腫瘤中,Cleaved Caspase-9水平降低可導致細胞凋亡缺陷,促進腫瘤細胞增殖、侵襲和耐藥性形成;在神經(jīng)退行性疾病或缺血性疾病中,???
實驗操作關鍵
樣本前處理
細胞樣本:用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留,固定(如4%多聚甲醛)后按需進行通透處理(0.3% Triton X-100),封閉液(5% BSA或血清)孵育30-60分鐘以降低非特異性結合。
組織樣本:石蠟切片需先脫蠟水化,根據(jù)抗體類型選擇合適的抗原修復方法(如檸檬酸鹽緩沖液熱修復);新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育:通常4℃過夜孵育(12-16小時),或室溫孵育1-2小時;孵育時需保證樣本完全被抗體覆蓋,可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結合:選擇與一抗種屬匹配的二抗,室溫避光孵育30-60分鐘;洗板/洗片需充分,通常用PBS或TBST清洗3-5次,每次5分鐘,去除未結合的二抗。
結果檢測
熒光檢測:熒光標記抗體需避光操作,封片時使用抗淬滅劑,染色后1小時內(nèi)完成觀察,或4℃避光保存不超過4小時。
顯色反應:酶標抗體需嚴格控制底物孵育時間,避免顯色過度或不足;終止反應后及時讀取數(shù)據(jù),部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
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關鍵字: 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-9抗體;35/50 kDa;Rabbit;
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