活化誘導(dǎo)分子CD69抗體
原理特點
該抗體靶向CD69膜蛋白,原理是特異性結(jié)合免疫細(xì)胞活化標(biāo)志物CD69抗原位點,CD69是T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞早期活化的標(biāo)志性膜蛋白。產(chǎn)品特點為免疫細(xì)胞活化靶向特異性強(qiáng),可精準(zhǔn)識別早期活化免疫細(xì)胞,靈敏度高,適配流式細(xì)胞術(shù)、免疫組化檢測,用于免疫活化、炎癥反應(yīng)、免疫功能評估研究。
英文名稱:CD69 Rabbit pAb
中文名稱:活化誘導(dǎo)分子CD69抗體

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:CLEC2C; AIM; Early activation antigen CD69; Early T-cell activation antigen p60; GP32/28; Leukocyte surface antigen Leu-23; MLR-3; EA1; BL-AC/P26; C-type lectin domain family 2 member C; CD69_HUMAN;
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human CD69
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:22 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
免疫細(xì)胞活化標(biāo)記:活化誘導(dǎo)分子CD69是跨膜糖蛋白,是T細(xì)胞、B細(xì)胞、NK細(xì)胞等免疫細(xì)胞活化的早期標(biāo)志物,在免疫細(xì)胞活化后快速表達(dá),參與免疫細(xì)胞增殖、分化和歸巢調(diào)控,維持機(jī)體免疫功能穩(wěn)態(tài)。
免疫應(yīng)答調(diào)控:CD69可通過與S1P受體結(jié)合,抑制免疫細(xì)胞遷移,促進(jìn)免疫細(xì)胞在炎癥或腫瘤部位停留,增強(qiáng)免疫應(yīng)答;其表達(dá)異常與自身免疫病、感染性疾病、腫瘤等相關(guān)。
臨床應(yīng)用:CD69抗體可用于檢測免疫細(xì)胞活化狀態(tài),評估免疫功能和疾病狀態(tài);研究免疫應(yīng)答調(diào)控機(jī)制、疾病發(fā)病機(jī)制,開發(fā)免疫調(diào)節(jié)或抗腫瘤藥物,通過調(diào)控CD69活性干???
樣本處理與實驗操作
1. Western Blot(免疫印跡)
樣本制備
細(xì)胞樣本:PBS洗滌2-3次,加入RIPA裂解液(含1% PMSF和磷酸酶抑制劑),冰上裂解30分鐘,12000rpm離心15分鐘取上清,BCA法定量蛋白濃度
組織樣本:液氮研磨成粉末,加入裂解液冰上裂解,離心后取上清,調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理:加入5×SDS上樣緩沖液,95℃加熱5-10分鐘,冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后,用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜(12-16小時),或室溫孵育1-2小時;孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次,每次5分鐘;加入二抗(1:5000-1:10000稀釋)室溫孵育1-2小時
再次洗滌后,用ECL發(fā)光液顯影,通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P(石蠟切片免疫組化)
樣本前處理
脫蠟水化:依次放入二甲苯(2次,每次10分鐘)、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇(各5分鐘),最后用PBS沖洗
抗原修復(fù):將切片放入檸檬酸鹽緩沖液(pH6.0)中,微波爐加熱至沸騰,保持10-15分鐘,自然冷卻至室溫
封閉處理:3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶,PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上,4℃孵育過夜;孵育時置于濕盒中,防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘,PBS沖洗3次,每次5分鐘;加入二抗(生物素標(biāo)記)室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后,加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘,DAB顯色劑顯色(顯微鏡下觀察控制時間,通常3-10分鐘),蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF(細(xì)胞免疫熒光)
樣本制備
細(xì)胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度,PBS洗滌2次,4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理(根據(jù)抗體類型選擇):0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘,PBS沖洗3次
封閉處理:5% BSA室溫封閉30-60分鐘,減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上,4℃孵育過夜,或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次,每次5分鐘;加入熒光標(biāo)記二抗(1:200-1:500稀釋),室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后,用抗淬滅封片液封片,熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)
包被與封閉
用包被緩沖液(如碳酸鹽緩沖液pH9.6)稀釋抗原至合適濃度,每孔加入100μl,4℃包被過夜
棄去包被液,PBST洗滌3次,每次3分鐘;加入封閉液(5% BSA)每孔200μl,37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后,每孔加入100μl,37℃孵育1-2小時,或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次,加入稀釋好的酶標(biāo)二抗,每孔100μl,37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液(如TMB)每孔100μl,37℃避光顯色10-20分鐘,加入終止液(2M H?SO?),用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
公司正在出售的產(chǎn)品
細(xì)胞角蛋白7抗體 | APC標(biāo)記的兔抗雞IgG H&L | blue-sensitive visual pigment Antibody Blocking Peptide |
蛋白磷酸酯酶-1B抗體 | Alexa Fluor 647標(biāo)記的羊抗人IgG H&L | DNAJA3 Antibody Blocking Peptide |
脂多糖相關(guān)反應(yīng)蛋白5/γ-taxilin抗體 | Cy7標(biāo)記的兔抗人IgG H&L | GPR141 Antibody Blocking Peptide |
防御素β2/Defensin β2抗體 | Cy3標(biāo)記的兔抗人IgA | GDNF Receptor alpha 2 Antibody Blocking Peptide |
SC5DL蛋白抗體 | Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗大鼠IgG H&L | MXRA5 Antibody Blocking Peptide |
FosB抗體 | 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的兔抗雞IgM | SIPA1L2 Antibody Blocking Peptide |
磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體 | 活化誘導(dǎo)分子CD69抗體羅丹明標(biāo)記的鼠抗人IgG H&L單克隆抗體 | CHAF1B Antibody Blocking Peptide |
鉬輔因子合成蛋白3抗體 | Cy5.5標(biāo)記的小鼠抗兔IgG H&L | GNB2 Antibody Blocking Peptide |
組蛋白轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)蛋白3抗體 | 堿性磷酸酶(AP)標(biāo)記的驢抗人IgG H&L | CCDC25 Antibody Blocking Peptide |
關(guān)鍵字: 活化誘導(dǎo)分子CD69抗體;22 kDa;Rabbit;
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