基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體
原理特點(diǎn)
該抗體靶向MMP9明膠酶，原理是特異性結(jié)合MMP9抗原位點(diǎn)，降解基底膜膠原，主導(dǎo)腫瘤浸潤(rùn)、炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)、血管新生。產(chǎn)品特點(diǎn)為特異性區(qū)分MMP9與MMP2，背景噪音低，重復(fù)性好，是腫瘤轉(zhuǎn)移、炎癥損傷、血管病變研究的常用抗體。
英文名稱:MMP9 Rabbit pAb
中文名稱:基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Matrix metalloproteinase-9 precursor; MMP-9; MMP9; MMP 9; 92 kDa type IV; Collagenase; 92 kDa gelatinase; Gelatinase B; GELB; MMP9_HUMAN; 82 kDa matrix metalloproteinase-9; 92 kDa type IV collagenase; CLG 4B; CLG-4B; CLG4B; Collagenase Type 4 beta; Collagenase Type-4 beta; Collagenase type IV 92 KD; Collagenase type IV 92 KD; EC 3.4.24.35; Gelatinase 92 KD; Gelatinase 92 KD; Gelatinase beta; Gelatinase-beta; GelatinaseB; GELB; Macrophage gelatinase; MANDP2; Matrix metallopeptidase 9(gelatinase B, 92kDa gelatinase, 92kDa type IV collagenase); Matrix Metalloproteinase 9; Type V collagenase.
交叉反應(yīng):Human
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human MMP9
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：78 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
明膠酶B特性：基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP9），又稱明膠酶B，是MMP家族中可降解Ⅳ型膠原和明膠的關(guān)鍵酶，參與ECM重塑、血管生成、炎癥反應(yīng)、腫瘤侵襲等過程，是組織修復(fù)和病理進(jìn)展的重要調(diào)控因子。
疾病關(guān)聯(lián)：MMP9在多種炎癥性疾?。ㄈ绶窝住㈩愶L(fēng)濕關(guān)節(jié)炎）、腫瘤、心血管疾病中高表達(dá)，促進(jìn)組織損傷、腫瘤轉(zhuǎn)移和血管生成，其表達(dá)水平與疾病嚴(yán)重程度和不良預(yù)后密切相關(guān)。
臨床應(yīng)用：MMP9抗體可用于檢測(cè)體液或組織中MMP9表達(dá)水平，評(píng)估疾病活動(dòng)度和預(yù)后；開發(fā)靶向MMP9的治療藥物，如MMP9抑制劑可抑制炎癥反應(yīng)、腫瘤轉(zhuǎn)移???
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
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