堿性磷酸酶(組織非特異性)抗體
原理特點(diǎn)
該抗體靶向組織非特異性堿性磷酸酶，原理是特異性識別廣譜表達(dá)的ALP抗原位點(diǎn)，參與組織代謝、骨重塑、細(xì)胞分化。產(chǎn)品特點(diǎn)為廣譜特異性高，不與組織特異性ALP交叉反應(yīng)，穩(wěn)定性好，適配細(xì)胞分化、骨代謝、組織損傷檢測研究。
英文名稱:Alkaline Phosphatase, Tissue Non-Specific isozyme Rabbit pAb
中文名稱:堿性磷酸酶(組織非特異性)抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:AKP2; Alkaline phosphatase liver/bone/kidney; Alkaline phosphatase liver/bone/kidney isozyme; Alkaline phosphatase tissue nonspecific isozyme; Alkaline phosphatase, tissue-nonspecific isozyme; ALPL; AP TNAP; AP-TNAP; APTNAP; BALP; BAP; FLJ40094; FLJ93059; Glycerophosphatase; HOPS; Liver/bone/kidney isozyme; Liver/bone/kidney type alkaline phosphatase; MGC161443; MGC167935; PHOA; PPBT_HUMAN; Tissue non specific alkaline phosphatase; Tissue nonspecific ALP; TNAP; TNSALP.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Alkaline Phosphatase, Tissue Non-Specific isozyme
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：56 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
酶學(xué)功能與組織表達(dá)：組織非特異性堿性磷酸酶（TNAP）是依賴Zn2?的磷酸酯酶，主要表達(dá)于骨骼、肝臟、腎臟等組織，參與骨礦化、磷代謝、解毒等生理過程，維持組織穩(wěn)態(tài)和代謝平衡。
疾病診斷與關(guān)聯(lián)：TNAP水平異常與骨代謝疾?。ㄈ缲E病、骨質(zhì)疏松癥）、肝膽疾病（如肝炎、肝硬化）、腎功能異常等相關(guān)，其血清水平可輔助疾病診斷、病情監(jiān)測和預(yù)后評估。
研究應(yīng)用：TNAP抗體可用于檢測TNAP表達(dá)水平和活性，研究骨礦化機(jī)制、疾病發(fā)病機(jī)制，開發(fā)治療骨代謝疾病和肝膽疾病的藥物；評估TNAP水平與疾病狀態(tài)和治療效果的關(guān)聯(lián)，指導(dǎo)???
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強(qiáng)度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 堿性磷酸酶(組織非特異性)抗體;56 kDa;Rabbit;
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