產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 淋巴增強(qiáng)因子-1抗體 | 貨號(hào) | YS-K7112 |
英文名稱 | LEF-1 Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:lymphoid enhancing factor-1; Transcription factor T cell specific 1 alpha; DKFZp586H0919; LEF 1; LEF1; Lymphoid enhancer binding factor 1; T cell specific transcription factor 1 alpha; TCF 1 alpha; TCF1 alpha; TCF1alpha; TCF1-alpha; LEF1_HUMAN; Lymphoid enhancer-binding factor 1; T cell-specific transcription factor 1-alpha.
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human LEF-1
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：44 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
淋巴增強(qiáng)因子-1是Wnt通路下游核心轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控淋巴細(xì)胞發(fā)育、分化、增殖，同時(shí)參與腫瘤細(xì)胞干性維持與異常增殖。該抗體可特異性結(jié)合該轉(zhuǎn)錄因子，檢測(cè)其核內(nèi)表達(dá)與活化水平，評(píng)估Wnt通路及淋巴細(xì)胞發(fā)育狀態(tài)；同時(shí)可阻斷其轉(zhuǎn)錄調(diào)控功能，抑制靶基因轉(zhuǎn)錄，干擾淋巴細(xì)胞發(fā)育與腫瘤干性活化。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：LEF1 是 Wnt/β-catenin 通路核心轉(zhuǎn)錄因子，調(diào)控淋巴細(xì)胞發(fā)育、毛囊再生、腫瘤干細(xì)胞增殖，淋巴瘤、實(shí)體瘤異常激活。
作用原理：靶向 LEF1 HMG DNA 結(jié)合結(jié)構(gòu)域，核定位信號(hào)清晰，區(qū)分 TCF 同源轉(zhuǎn)錄因子。
產(chǎn)品特點(diǎn)：免疫組化可標(biāo)記淋巴瘤腫瘤細(xì)胞、毛囊干細(xì)胞；用于造血發(fā)育、Wnt 通路靶向藥物、腫瘤干性評(píng)估。
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核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
關(guān)鍵字： 淋巴增強(qiáng)因子-1抗體;44 kDa;Rabbit;
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