產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 磷酸化Akt1重組兔單抗 | 貨號(hào) | YS-K7938 |
英文名稱 | phospho-Akt1 (Ser473) Recombinant Rabbit mAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:Akt(phospho-Ser473); AKT(phospho-S473); AKT(phospho S473); p-AKT(Ser473); AKT 1; AKT; AKT1; AKT-1; AKT1_HUMAN; C AKT; cAKT; MGC9965; MGC99656; Oncogene AKT1; PKB; PKB alpha; PKB-ALPHA; PRKBA; Protein Kinase B alpha; Protein kinase B; Proto-oncogene c-Akt; RAC alpha; RAC alpha serine/threonine protein kinase; RAC; RAC PK alpha; Rac protein kinase alpha; RAC Serine/Threonine Protein Kinase; RAC-alpha serine/threonine-protein kinase; RAC-PK-alpha; v akt murine thymoma viral oncogene homolog 1; vAKT Murine Thymoma Viral Oncogene Homolog 1.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human Akt1 around the phosphorylation site of Ser473
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號(hào)：12A1
理論分子量：56 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
磷酸化Akt1是Akt1蛋白的活化形式，為PI3K/Akt通路核心活化標(biāo)志物，調(diào)控細(xì)胞存活、增殖、代謝與抗凋亡過程。該重組兔單抗可高特異性識(shí)別磷酸化位點(diǎn)特異性抗原，不結(jié)合總Akt1與非磷酸化蛋白，精準(zhǔn)檢測(cè)Akt1活化水平；可特異性阻斷磷酸化Akt1介導(dǎo)的下游存活信號(hào)，抑制細(xì)胞異常增殖與抗凋亡活性，適用于腫瘤、代謝通路精準(zhǔn)研究。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：Akt1 絲蘇氨酸激酶，磷酸化位點(diǎn) Ser473/Thr308 為活化形式，主控細(xì)胞存活、增殖、腫瘤耐藥、代謝調(diào)控。
作用原理：重組兔單抗特異性結(jié)合磷酸化修飾位點(diǎn)肽段，完全不識(shí)別總 Akt1 非活化蛋白。
產(chǎn)品特點(diǎn)：修飾位點(diǎn)專一、背景極低，批次穩(wěn)定可重復(fù)；用于 PI3K/Akt 通路活化定量、靶向藥物抑制效果驗(yàn)證、腫瘤預(yù)后分級(jí)。
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實(shí)驗(yàn)優(yōu)化與注意事項(xiàng)
抗體濃度優(yōu)化
方陣滴定法：設(shè)置一抗?jié)舛忍荻龋ㄈ?/span>1:200, 1:500, 1:1000）和二抗?jié)舛忍荻?，選擇信噪比最高的組合
預(yù)實(shí)驗(yàn)：首次使用建議進(jìn)行濃度梯度預(yù)實(shí)驗(yàn)，確定最佳工作濃度
樣本處理要點(diǎn)
細(xì)胞樣本：貼壁細(xì)胞用細(xì)胞刮收集，懸浮細(xì)胞離心收集，盡量吸盡上清避免殘留培養(yǎng)基
組織樣本：新鮮組織建議液氮速凍后-80℃保存，避免反復(fù)凍融
磷酸化蛋白：全程冰上操作，加入磷酸酶抑制劑防止蛋白去磷酸化
結(jié)果判斷與分析
WB：觀察是否出現(xiàn)特異性條帶，陰性對(duì)照應(yīng)無條帶或明顯弱于陽(yáng)性對(duì)照
IHC：陽(yáng)性信號(hào)應(yīng)定位于目標(biāo)蛋白的正常亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)（如細(xì)胞核、細(xì)胞膜）
IF：觀察熒光信號(hào)是否與目標(biāo)蛋白亞細(xì)胞定位一致，DAPI染色定位細(xì)胞核
關(guān)鍵字： 磷酸化Akt1重組兔單抗;56 kDa;Rabbit;
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