產(chǎn)品屬性

產(chǎn)品名稱 | 磷酸化IKB alpha抗體 | 貨號 | YS-K7118 |
英文名稱 | phospho-IKB alpha (Tyr305) Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實驗 |
商品介紹

產(chǎn)品應(yīng)用:

Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:IKB alpha(phospho Y305); p-IKB alpha(phospho Y305); NFKBIA(phospho Y305); Inhibitor of KB alpha; I kappa B alpha; I(Kappa)B(alpha); IkappaBalpha; IKBA; IKBalpha; IkB-alpha; MAD 3; MAD3; Major histocompatibility complex enhancer binding protein MAD3; NF kappa B inhibitor alpha; NFKBI; NFKBIA; Nuclear factor of kappa light chain gene enhancer in B cells; Nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B cells inhibitor alpha; IKBA_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human IKB alpha around the phosphorylation site of Tyr305
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量:35 kDa
濃度:1mg/ml
儲存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件:Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點

磷酸化IKB alpha是NF-κB通路活化的關(guān)鍵標志,IKB alpha磷酸化后發(fā)生降解,釋放NF-κB入核啟動炎癥基因轉(zhuǎn)錄。該抗體特異性識別IKB alpha磷酸化位點,精準檢測NF-κB通路活化程度與炎癥啟動水平;同時可結(jié)合磷酸化蛋白抑制其降解,阻斷NF-κB核轉(zhuǎn)位,抑制炎癥級聯(lián)反應(yīng)。
靶點背景

靶點背景:IκBα 結(jié)合 NF-κB 使其滯留胞質(zhì);Ser32/36 磷酸化后快速泛素降解,釋放 NF-κB 入核啟動炎癥轉(zhuǎn)錄。
作用原理:特異性識別磷酸化修飾 IκBα,不結(jié)合穩(wěn)定未磷酸化總 IκBα 蛋白。
產(chǎn)品特點:NF-κB 通路激活早期標志物,WB、IHC 可定量炎癥活化強度;用于自身免疫病、感染炎癥、腫瘤炎癥微環(huán)境檢測。
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實驗操作關(guān)鍵

樣本前處理
細胞樣本:用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留,固定(如4%多聚甲醛)后按需進行通透處理(0.3% Triton X-100),封閉液(5% BSA或血清)孵育30-60分鐘以降低非特異性結(jié)合。
組織樣本:石蠟切片需先脫蠟水化,根據(jù)抗體類型選擇合適的抗原修復(fù)方法(如檸檬酸鹽緩沖液熱修復(fù));新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育:通常4℃過夜孵育(12-16小時),或室溫孵育1-2小時;孵育時需保證樣本完全被抗體覆蓋,可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結(jié)合:選擇與一抗種屬匹配的二抗,室溫避光孵育30-60分鐘;洗板/洗片需充分,通常用PBS或TBST清洗3-5次,每次5分鐘,去除未結(jié)合的二抗。
結(jié)果檢測
熒光檢測:熒光標記抗體需避光操作,封片時使用抗淬滅劑,染色后1小時內(nèi)完成觀察,或4℃避光保存不超過4小時。
顯色反應(yīng):酶標抗體需嚴格控制底物孵育時間,避免顯色過度或不足;終止反應(yīng)后及時讀取數(shù)據(jù),部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
關(guān)鍵字: 磷酸化IKB alpha抗體;35 kDa;Rabbit;
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