磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體
原理特點(diǎn)
磷酸化GCN2是氨基酸饑餓、應(yīng)激應(yīng)答的核心活化激酶，調(diào)控細(xì)胞蛋白質(zhì)合成、應(yīng)激適應(yīng)。該抗體特異性識(shí)別GCN2磷酸化位點(diǎn)，檢測(cè)細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激活化狀態(tài)；同時(shí)可阻斷激酶活性，解除應(yīng)激介導(dǎo)的蛋白合成抑制。
英文名稱(chēng):phospho-GCN2 (Thr899) Rabbit pAb
中文名稱(chēng):磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:GCN2(phospho T899); p-GCN2(phospho T899); EIF2AK4; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2-alpha kinase 4; GCN2-like protein; KIAA1338; E2AK4_HUMAN; Eif2ak4; Eukaryotic Translation Initiation Factor 2 alpha kinase 4; GCN2; GCN2 eIF2alpha kinase; GCN2-like protein; MGCN2.
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來(lái)源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human GCN2 around the phosphorylation site of Thr899
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類(lèi)型:Polyclonal
理論分子量：189 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：GCN2 是氨基酸匱乏應(yīng)激感知激酶，氨基酸不足時(shí)自身蘇氨酸位點(diǎn)磷酸化激活，磷酸化 eIF2α 抑制全局蛋白翻譯，啟動(dòng)應(yīng)激保護(hù)。
抗體原理：GCN2 活化環(huán)磷酸多肽免疫，特異性標(biāo)記磷酸活化態(tài) GCN2，不識(shí)別靜息酶蛋白。
產(chǎn)品特點(diǎn)：用于營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激、腫瘤氨基酸代謝、病毒感染翻譯抑制機(jī)制研究，WB 可量化激酶活化程度。
實(shí)驗(yàn)操作關(guān)鍵
樣本前處理
細(xì)胞樣本：用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留，固定（如4%多聚甲醛）后按需進(jìn)行通透處理（0.3% Triton X-100），封閉液（5% BSA或血清）孵育30-60分鐘以降低非特異性結(jié)合。
組織樣本：石蠟切片需先脫蠟水化，根據(jù)抗體類(lèi)型選擇合適的抗原修復(fù)方法（如檸檬酸鹽緩沖液熱修復(fù)）；新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃過(guò)夜孵育（12-16小時(shí)），或室溫孵育1-2小時(shí)；孵育時(shí)需保證樣本完全被抗體覆蓋，可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結(jié)合：選擇與一抗種屬匹配的二抗，室溫避光孵育30-60分鐘；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分鐘，去除未結(jié)合的二抗。
結(jié)果檢測(cè)
熒光檢測(cè)：熒光標(biāo)記抗體需避光操作，封片時(shí)使用抗淬滅劑，染色后1小時(shí)內(nèi)完成觀察，或4℃避光保存不超過(guò)4小時(shí)。
顯色反應(yīng)：酶標(biāo)抗體需嚴(yán)格控制底物孵育時(shí)間，避免顯色過(guò)度或不足；終止反應(yīng)后及時(shí)讀取數(shù)據(jù)，部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
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關(guān)鍵字： 磷酸化蛋白激酶GCN2蛋白抗體;189 kDa;Rabbit;
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