磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體
原理特點
磷酸化JAK2是JAK-STAT通路關(guān)鍵活化激酶，介導(dǎo)細(xì)胞增殖、造血、炎癥、免疫信號傳導(dǎo)。該抗體特異性識別JAK2磷酸化位點，檢測通路活化水平；阻斷激酶活性可抑制下游STAT信號，干預(yù)造血異常與炎癥免疫應(yīng)答。
英文名稱:phospho-JAK2 (Tyr1007+Tyr1008) Rabbit pAb
中文名稱:磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體
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英文別名:JAK2(phospho Y1007); p-JAK2(phospho Y1007); JAK2(phospho Y1007+Y1008); p-JAK2(phospho Y1007+Y1008); JAK2(phospho-Tyr1007/1008); Tyrosine protein kinase JAK2; JAK 2; JAK-2; JAK2; JAK2_HUMAN; Janus Activating Kinase 2; Janus Kinase 2; JTK 10; JTK10; OTTHUMP00000043260; Tyrosine-protein kinase JAK2; Tyrosine protein kinase JAK2.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat,Zebrafish
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human JAK2 around the phosphorylation site of Tyr1007/1008
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：131 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點背景
靶點背景：JAK2 是 JAK 家族關(guān)鍵酪氨酸激酶，細(xì)胞因子（EPO、IL6、GH）刺激下酪氨酸磷酸化激活，磷酸化 STAT 分子啟動增殖造血、炎癥信號；V617F 突變持續(xù)活化驅(qū)動骨髓增殖性腫瘤。
抗體原理：JAK2 活化環(huán)磷酸多肽免疫純化，僅識別磷酸活化 JAK2，不結(jié)合靜息 JAK2 及 JAK1/3。
產(chǎn)品特點：造血疾病、炎癥、代謝激素通路檢測主力試劑，可用于骨髓組織病理、血細(xì)胞流式分型。
核心實驗操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時，孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號強度調(diào)整曝光時間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實驗
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時或4℃過夜。
檢測：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體;Rabbit;131 kDa;
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