磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體
原理特點(diǎn)
該催化亞基磷酸化活化啟動PI3K酶促反應(yīng)，是通路激活的核心步驟。該抗體特異性識別其磷酸化位點(diǎn)，精準(zhǔn)檢測PI3K通路核心活化水平；阻斷催化功能可全面抑制PI3K下游信號傳導(dǎo)。
英文名稱:phospho-PI3KCA (Tyr317) Rabbit pAb
中文名稱:磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:PIK3CA(phospho Y317); PI3 kinase p110 subunit alpha; caPI3K; MGC142161; MGC142163; p110 alpha; Phosphatidylinositol 3 kinase catalytic alpha polypeptide; Phosphatidylinositol 3 kinase catalytic 110 KD alpha; Phosphatidylinositol 4 5 bisphosphate 3 kinase catalytic subunit alpha isoform; phosphoinositide 3 kinase catalytic alpha polypeptide; PI3 kinase p110 subunit alpha; PI3K; PI3KC A; PIK3C A; PIK3CA; PK3CA; PtdIns 3 kinase p110; PI3-kinase P110α; PI3-kinase p110 subunit alpha; PI 3 Kinase catalytic subunit alpha; PK3CA_HUMAN; PI3 kinase P110α.
交叉反應(yīng):Human,Mouse
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human PI3KCA around the phosphorylation site of Tyr317
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
克隆號：None
理論分子量：124 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：PIK3CA 編碼 p110α 催化亞基，是腫瘤高頻突變靶點(diǎn)；蘇氨酸 / 酪氨酸磷酸化直接決定激酶催化活性，驅(qū)動細(xì)胞增殖癌變。
抗體原理：針對 p110α 保守磷酸化位點(diǎn)合成修飾肽免疫，專一捕獲磷酸化激活催化亞基，不識別 p110β/γ。
產(chǎn)品特點(diǎn)：適配腫瘤石蠟樣本高通量篩查，可定量突變型與野生型 p110α 磷酸化水平，用于乳腺癌、結(jié)直腸癌靶向通路藥效評價。
實(shí)驗操作關(guān)鍵
樣本前處理
細(xì)胞樣本：用PBS緩沖液輕洗2-3次去除培養(yǎng)基殘留，固定（如4%多聚甲醛）后按需進(jìn)行通透處理（0.3% Triton X-100），封閉液（5% BSA或血清）孵育30-60分鐘以降低非特異性結(jié)合。
組織樣本：石蠟切片需先脫蠟水化，根據(jù)抗體類型選擇合適的抗原修復(fù)方法（如檸檬酸鹽緩沖液熱修復(fù)）；新鮮組織需盡快固定或冷凍保存。
抗體孵育
一抗孵育：通常4℃過夜孵育（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時需保證樣本完全被抗體覆蓋，可放置于濕盒中防止液體揮發(fā)。
二抗結(jié)合：選擇與一抗種屬匹配的二抗，室溫避光孵育30-60分鐘；洗板/洗片需充分，通常用PBS或TBST清洗3-5次，每次5分鐘，去除未結(jié)合的二抗。
結(jié)果檢測
熒光檢測：熒光標(biāo)記抗體需避光操作，封片時使用抗淬滅劑，染色后1小時內(nèi)完成觀察，或4℃避光保存不超過4小時。
顯色反應(yīng)：酶標(biāo)抗體需嚴(yán)格控制底物孵育時間，避免顯色過度或不足；終止反應(yīng)后及時讀取數(shù)據(jù)，部分顯色產(chǎn)物易褪色需盡快分析。
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關(guān)鍵字： 磷酸化磷脂酰肌醇激酶催化亞單位A抗體;124 kDa;Rabbit;
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