產(chǎn)品屬性
產(chǎn)品名稱 | 破骨細(xì)胞相關(guān)受體抗體 | 貨號 | YS-K7281 |
英文名稱 | OSCAR Rabbit pAb | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
商品介紹
產(chǎn)品應(yīng)用:
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:hOSCAR; hOSCARM2; hOSCARM3; mOSCAR; Oscar; Oscar protein; OSCAR_HUMAN; OSCARS1; OSCARS2; Osteoclast associated immunoglobulin like receptor; Osteoclast associated receptor; Osteoclast-associated immunoglobulin-like receptor; Osteoclast-associated receptor; PIgR-3; PIGR3; Poly Ig receptor 3; Poly-Ig receptor 3; Polymeric immunoglobulin receptor 3.
交叉反應(yīng):
抗體來源:Rabbit
免疫原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human OSCAR
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Polyclonal
理論分子量：28 kDa
濃度：1mg/ml
儲存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
原理特點(diǎn)
該抗體靶向破骨細(xì)胞相關(guān)受體，該受體介導(dǎo)破骨細(xì)胞活化、分化、骨吸收功能，調(diào)控骨代謝重塑。該抗體可特異性標(biāo)記活化破骨細(xì)胞，檢測受體表達(dá)水平，評估骨吸收活性；同時可封閉受體功能，抑制破骨細(xì)胞分化與骨吸收，助力研究骨質(zhì)疏松、骨破壞疾病機(jī)制。
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：破骨前體細(xì)胞表面免疫受體，協(xié)同 RANK 信號促進(jìn)破骨細(xì)胞分化、骨吸收；類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、骨質(zhì)疏松骨破壞關(guān)鍵分子。
抗體作用原理：靶向 OSCAR 胞外免疫球蛋白樣結(jié)構(gòu)域，特異性標(biāo)記破骨譜系細(xì)胞，不結(jié)合成骨細(xì)胞。
產(chǎn)品特點(diǎn)：骨組織 IHC、骨髓細(xì)胞流式分群；骨質(zhì)疏松、類風(fēng)濕骨侵蝕、牙周骨吸收、腫瘤骨轉(zhuǎn)移溶骨模型檢測。
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樣本處理與實(shí)驗(yàn)操作
1. Western Blot（免疫印跡）
樣本制備
細(xì)胞樣本：PBS洗滌2-3次，加入RIPA裂解液（含1% PMSF和磷酸酶抑制劑），冰上裂解30分鐘，12000rpm離心15分鐘取上清，BCA法定量蛋白濃度
組織樣本：液氮研磨成粉末，加入裂解液冰上裂解，離心后取上清，調(diào)整蛋白濃度至一致
變性處理：加入5×SDS上樣緩沖液，95℃加熱5-10分鐘，冷卻后上樣
抗體孵育
轉(zhuǎn)膜完成后，用5% BSA或牛奶封閉液室溫封閉1-2小時
一抗稀釋后4℃孵育過夜（12-16小時），或室溫孵育1-2小時；孵育時保證膜完全浸沒在抗體溶液中
TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘；加入二抗（1:5000-1:10000稀釋）室溫孵育1-2小時
再次洗滌后，用ECL發(fā)光液顯影，通過凝膠成像系統(tǒng)采集圖像
2. IHC-P（石蠟切片免疫組化）
樣本前處理
脫蠟水化：依次放入二甲苯（2次，每次10分鐘）、無水乙醇、95%乙醇、80%乙醇、70%乙醇（各5分鐘），最后用PBS沖洗
抗原修復(fù)：將切片放入檸檬酸鹽緩沖液（pH6.0）中，微波爐加熱至沸騰，保持10-15分鐘，自然冷卻至室溫
封閉處理：3% H?O?室溫孵育10分鐘滅活內(nèi)源性過氧化物酶，PBS沖洗后用10%山羊血清封閉30分鐘
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在切片上，4℃孵育過夜；孵育時置于濕盒中，防止液體揮發(fā)
次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入二抗（生物素標(biāo)記）室溫孵育30分鐘
PBS沖洗后，加入ABC復(fù)合物室溫孵育30分鐘，DAB顯色劑顯色（顯微鏡下觀察控制時間，通常3-10分鐘），蘇木素復(fù)染后脫水封片
3. ICC/IF（細(xì)胞免疫熒光）
樣本制備
細(xì)胞爬片培養(yǎng)至70-80%匯合度，PBS洗滌2次，4%多聚甲醛固定15-20分鐘
通透處理（根據(jù)抗體類型選擇）：0.1% Triton X-100室溫孵育10分鐘，PBS沖洗3次
封閉處理：5% BSA室溫封閉30-60分鐘，減少非特異性結(jié)合
抗體孵育
一抗稀釋后滴加在爬片上，4℃孵育過夜，或室溫孵育1-2小時
PBS沖洗3次，每次5分鐘；加入熒光標(biāo)記二抗（1:200-1:500稀釋），室溫避光孵育30-60分鐘
再次沖洗后，用抗淬滅封片液封片，熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察采集圖像
4. ELISA（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)）
包被與封閉
用包被緩沖液（如碳酸鹽緩沖液pH9.6）稀釋抗原至合適濃度，每孔加入100μl，4℃包被過夜
棄去包被液，PBST洗滌3次，每次3分鐘；加入封閉液（5% BSA）每孔200μl，37℃孵育1-2小時
抗體孵育
一抗按比例稀釋后，每孔加入100μl，37℃孵育1-2小時，或4℃孵育過夜
PBST洗滌3次，加入稀釋好的酶標(biāo)二抗，每孔100μl，37℃孵育1小時
洗滌后加入底物溶液（如TMB）每孔100μl，37℃避光顯色10-20分鐘，加入終止液（2M H?SO?），用酶標(biāo)儀在450nm波長讀取OD值
關(guān)鍵字： 破骨細(xì)胞相關(guān)受體抗體;28 kDa;Rabbit;
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