磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1重組兔單抗
原理特點(diǎn)
該重組兔單抗高特異性靶向磷酸化YAP1蛋白，親和力高、檢測(cè)背景低，可精準(zhǔn)識(shí)別低豐度磷酸化修飾的YAP1。其可高精度定量檢測(cè)YAP1磷酸化水平，精準(zhǔn)反映Hippo通路活性與細(xì)胞增殖穩(wěn)態(tài)；同時(shí)可強(qiáng)效封閉磷酸化修飾位點(diǎn)，精準(zhǔn)調(diào)控YAP1核質(zhì)穿梭與轉(zhuǎn)錄活性，適配高精度腫瘤通路機(jī)制研究與靶向干預(yù)實(shí)驗(yàn)。
英文名稱:phospho-YAP1 (Ser127) Recombinant Rabbit mAb
中文名稱:磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1重組兔單抗
Not yet tested in other applications.
Optimal working dilutions must be determined by the end user.
英文別名:phospho-YAP1(S127); YAP1(S127); YAP1(phospho Ser127); YAP1(phospho S127); 65 kDa Yes associated protein; YAp 1; YAP 65; YAP; YAP2; YAP65; Yes associated protein 1 65kDa; Yes associated protein 1; Yes associated protein 2; YKI; Transcriptional coactivator YAP1; Yes-associated protein 1; Protein yorkie homolog; Yes-associated protein YAP65 homolog; YAP1_HUMAN.
交叉反應(yīng):Human,Mouse,Rat
抗體來源:Rabbit
免疫原:A synthesized peptide derived from human YAP1 around the phosphorylation site of S127
亞型:IgG
性狀:Liquid
純化方法:affinity purified by Protein A
克隆類型:Recombinant
克隆號(hào)：1H12
理論分子量：55 kDa
濃度：1mg/ml
儲(chǔ)存液：0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
保存條件：Shipped at 4℃. Store at -20℃ for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事項(xiàng)：This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
靶點(diǎn)背景
靶點(diǎn)背景：YAP1 Ser127 磷酸化負(fù)調(diào)控轉(zhuǎn)錄活性，是 Hippo 通路激活直接標(biāo)志物。
抗體原理：重組兔單克隆體外表達(dá)，精準(zhǔn)鎖定 Ser127 磷酸表位，批次無差異。
產(chǎn)品特點(diǎn)：共聚焦多色熒光、臨床腫瘤病理大樣本定量，數(shù)據(jù)重復(fù)性極高。
核心實(shí)驗(yàn)操作方法
1. Western Blot（WB）
抗體孵育
一抗孵育：用5%脫脂牛奶或BSA稀釋抗體至推薦濃度（如1:1000），4℃搖床緩慢孵育過夜；或室溫孵育1-2小時(shí)，孵育時(shí)保證膜完全浸沒在抗體溶液中。
洗滌：用TBST緩沖液洗滌3次，每次5分鐘，洗去未結(jié)合的一抗；加入HRP標(biāo)記二抗（1:5000-1:10000稀釋），室溫孵育1小時(shí)。
顯影：再次洗滌后，加入ECL發(fā)光液孵育1-2分鐘，用化學(xué)發(fā)光成像儀采集圖像，根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度調(diào)整曝光時(shí)間。
2. 免疫組化（IHC）
抗體孵育
一抗孵育：滴加稀釋后的一抗（如1:200）于組織切片上，置于濕盒中4℃孵育過夜；次日室溫復(fù)溫30分鐘，PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入生物素標(biāo)記二抗（1:200）室溫孵育30分鐘，PBS沖洗后加入ABC復(fù)合物（1:100）室溫孵育30分鐘。
顯色封片：DAB顯色劑顯色3-10分鐘（顯微鏡下觀察控制時(shí)間），蘇木素復(fù)染1分鐘，梯度乙醇脫水后中性樹膠封片。
3. 免疫熒光（IF）
抗體孵育
一抗孵育：用5% BSA稀釋抗體至工作濃度（如1:100），滴加在細(xì)胞爬片上，4℃避光孵育過夜；室溫復(fù)溫后PBS沖洗3次，每次5分鐘。
二抗結(jié)合：加入熒光標(biāo)記二抗（如FITC標(biāo)記抗兔IgG，1:200），室溫避光孵育30-60分鐘；PBS沖洗后用抗淬滅封片液封片。
觀察：熒光顯微鏡或共聚焦顯微鏡下觀察，激發(fā)波長(zhǎng)根據(jù)二抗標(biāo)記物選擇（如FITC為488nm）。
4. ELISA實(shí)驗(yàn)
包被與孵育
包被：用包被緩沖液（pH9.6碳酸鹽緩沖液）稀釋抗原至1-10μg/ml，每孔加入100μl，4℃過夜孵育。
封閉與一抗孵育：棄去包被液，PBST洗滌3次，加入5% BSA封閉液200μl/孔，37℃孵育1小時(shí)；加入稀釋后的一抗100μl/孔，37℃孵育1-2小時(shí)或4℃過夜。
檢測(cè)：洗滌后加入酶標(biāo)二抗（1:5000），37℃孵育1小時(shí)；TMB底物溶液顯色10-30分鐘，2M硫酸終止反應(yīng)后，酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)讀取OD值。
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關(guān)鍵字： 磷酸化原癌基因Yes相關(guān)蛋白1重組兔單抗;55 kDa;Rabbit;
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