樺樹(shù)源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒可用于檢測(cè)樺樹(shù)源性成分。現(xiàn)代食品加工工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性, 因此傳統(tǒng)的感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無(wú)法對(duì)食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏性,因此基于基因檢測(cè)的快速靈敏的食材來(lái)源檢測(cè)技術(shù)將對(duì)食品監(jiān)管和安全提供重要的保障。本產(chǎn)品是根據(jù)探針?lè)晒舛?PCR 原理開(kāi)發(fā)的樺樹(shù)源性成分檢測(cè)試劑盒,它具有下列特點(diǎn):
1. 即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板。
2. 引物等組分經(jīng)過(guò)優(yōu)化,靈敏度高。
3. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高,引物是根據(jù)樺樹(shù)源性成分 DNA 序列高度保守區(qū)設(shè)計(jì),不會(huì)跟其他生物樣本的 DNA 發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 既可用于定性檢測(cè),又可用于定量檢測(cè)。用于定量檢測(cè)時(shí)線性范圍至少為 5 個(gè)數(shù)量級(jí)。
6. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針?lè)晒舛?PCR 反應(yīng)。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研。

保存條件
低溫運(yùn)輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽(yáng)性對(duì)照需要單獨(dú)放置,不要污染其他試劑。
樺樹(shù)源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒使用方法
一、DNA 提取(樣本制備區(qū))
1. (選做)如果有 N 個(gè)樣品待提取,最好設(shè)置 N+2 個(gè)提取,多出的是 PC(樣品制備陽(yáng)性對(duì)照)和 NC(樣品制備陰性對(duì)照)??梢匀£?yáng)性對(duì)照的 1000 倍稀釋液 10μL 再加上一定量的水,使總體積與待提取樣品的規(guī)定體積一致,以此作為 PC。另外用水作為 NC。
2. 用自選方法提取純化樣品 DNA,本試劑盒跟市場(chǎng)上大多數(shù)核酸提取試劑盒兼容。
二、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(樣本制備區(qū))
(由于陽(yáng)性對(duì)照濃度高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,避免污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7 ,6 ,5 ,4 ,3 ,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光模板稀釋液,(最好用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1.00E+08 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1.00E+07 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1.00E+07 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1.00E+06 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1.00E+06 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1.00E+05 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
若無(wú)需制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,將陽(yáng)性對(duì)照稀釋到 1.00E+05 拷貝/μL 即可。
三、試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
準(zhǔn)備足量的 qPCR 管(樣品管、陰性對(duì)照管、陽(yáng)性對(duì)照管),向各 qPCR 管中分別加入下列成分。
(見(jiàn)詳細(xì)說(shuō)明書(shū))
四、添加模板(模板添加區(qū))
向 qPCR 管中分別加入 5 uL 模板,順序?yàn)殛幮詫?duì)照(DEPC-H2O)、待測(cè)樣品模板、樺樹(shù)源性成分 qPCR 陽(yáng)性對(duì)照,離心 30 秒,立即進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)。
(見(jiàn)詳細(xì)說(shuō)明書(shū))
五、擴(kuò)增反應(yīng)(擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū))
將 qPCR 管放置在 qPCR 擴(kuò)增儀器樣品槽相應(yīng)位置,進(jìn)行擴(kuò)增,擴(kuò)增程序如下:
(見(jiàn)詳細(xì)說(shuō)明書(shū))
樺樹(shù)源性成分探針?lè)晒舛縋CR試劑盒結(jié)果分析
1. 如果制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,則以陽(yáng)性對(duì)照濃度的 log 值為橫軸,以 Ct 值為縱軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測(cè)樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品 DNA 濃度的 log 值,推算出其濃度。
2. 如果未制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,按照如下標(biāo)準(zhǔn)判定結(jié)果:
陽(yáng)性對(duì)照(1.00E+05 拷貝/μL)結(jié)果:Ct 值<30 ,有明顯指數(shù)增長(zhǎng),呈典型的 S 型曲線。
陰性對(duì)照結(jié)果:Ct 值>40 或無(wú) Ct 值,無(wú)明顯指數(shù)增長(zhǎng)期和平臺(tái)期。
樣本檢測(cè)結(jié)果:Ct 值<38 ,有明顯指數(shù)增長(zhǎng),表明樣本中檢測(cè)出樺樹(shù)源性成分,結(jié)果為陽(yáng)性;Ct 值>40 或無(wú) Ct 值,表明樣本中未檢測(cè)出樺樹(shù)源性成分,結(jié)果為陰性;Ct值在 38-40 范圍,應(yīng)對(duì)樣本進(jìn)行復(fù)檢,如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果 Ct 值仍在 38-40 范圍,有明顯指數(shù)增長(zhǎng),則判定為陽(yáng)性,否則為陰性。
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上海雅吉生物科技的核心業(yè)務(wù)主要圍繞生命科學(xué)研究所需的各類(lèi)試劑、細(xì)胞、抗體及技術(shù)服務(wù)展開(kāi),具體可歸納為以下幾個(gè)方面:
細(xì)胞產(chǎn)品與技術(shù)平臺(tái):
細(xì)胞產(chǎn)品:提供包括正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞在內(nèi)的多種細(xì)胞系。同時(shí),公司也是美國(guó)ScienCell等品牌的原代細(xì)胞產(chǎn)品的代理商。
穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株構(gòu)建服務(wù):公司具備豐富的蛋白表達(dá)研究經(jīng)驗(yàn),能夠?yàn)榭蛻?hù)提供從基因序列到穩(wěn)定細(xì)胞株交付的一站式定制服務(wù),應(yīng)用于基因功能研究、藥物篩選和重組蛋白生產(chǎn)等領(lǐng)域。
科研試劑:這是公司的基礎(chǔ)和優(yōu)勢(shì)業(yè)務(wù)。產(chǎn)品線全面覆蓋了分子生物學(xué)、免疫學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)和微生物學(xué)等多個(gè)學(xué)科。
ELISA試劑盒:提供人、大鼠、小鼠、犬、魚(yú)、雞、牛等多種物種以及植物的ELISA檢測(cè)試劑盒,在國(guó)內(nèi)眾多重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室中廣泛使用并被科研文獻(xiàn)引用。生化試劑、抗體與血清:提供包括一抗、二抗、單克隆/多克隆抗體在內(nèi)的多種抗體產(chǎn)品,以及胎牛血清等細(xì)胞培養(yǎng)用血清。
蛋白研究相關(guān)試劑盒:提供超過(guò)300種針對(duì)不同樣本來(lái)源(動(dòng)物、植物、微生物)和不同細(xì)胞器(如線粒體、外泌體)的蛋白提取及檢測(cè)試劑盒。