大鼠精氨酰tRNA合成酶2(RARS2)重組蛋白用于線粒體翻譯調(diào)控、氨基酸加載酶活測(cè)定、線粒體病發(fā)病機(jī)制及突變蛋白功能驗(yàn)證研究。
型號(hào):YS-DB2863
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠精氨酰tRNA合成酶2(RARS2)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱(chēng):Recombinant Arginyl tRNA Synthetase 2, Mitochondrial (RARS2)
RARSL; DALRD2; ArgRS; Arginyl-tRNA Synthetase-Like; Arginine tRNA Ligase 2,Mitochondrial; Arginyl-tRNA synthetase
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來(lái)源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測(cè)分子量:33.9kDa
實(shí)際分子量:34kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽:Val313~Cys578 with N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 90%
等電點(diǎn):8.7
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理:

SDS-PAGE 純度分析:電泳分離蛋白,染色統(tǒng)計(jì)主條帶純度,排查降解片段、雜蛋白污染。
BCA 比色定量:蛋白還原二價(jià)銅顯色,吸光度線性定量重組蛋白濃度。
WB 特異性鑒定:RARS2 特異性抗體特異性結(jié)合重組蛋白,驗(yàn)證蛋白表達(dá)正確。
氨基酸活化酶活檢測(cè):催化精氨酸與對(duì)應(yīng) tRNA 氨?;悸?lián),檢測(cè) ATP 消耗速率定量氨酰 tRNA 合成酶活性。
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復(fù)溶操作要點(diǎn):

復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒:移液槍頭、離心管需經(jīng)過(guò)高壓滅菌或一次性無(wú)菌處理,避免引入污染。
緩沖液選擇:優(yōu)先使用產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)推薦的專(zhuān)用復(fù)溶緩沖液,若無(wú)推薦可使用:
基礎(chǔ)型:20mM Tris-HCl(pH7.5)+ 150mM NaCl
保護(hù)型:在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白:膜蛋白需添加去垢劑(如0.05% Triton X-100),酶類(lèi)需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心:將凍干蛋白管置于離心機(jī),4℃下8000rpm離心30秒,使底部蛋白集中。
緩慢加液:沿管壁緩慢加入適量緩沖液,避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解:輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸,禁止渦旋振蕩(易導(dǎo)致蛋白變性)。
靜置溶解:4℃靜置10-30分鐘,難溶蛋白可延長(zhǎng)至1小時(shí),期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字: 大鼠精氨酰tRNA合成酶2;RARS2;重組蛋白;
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