大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白用于氨基肽酶酶活測定、蛋白水解代謝、腫瘤侵襲相關(guān)降解通路研究實驗。

型號：YS-DB215

產(chǎn)品名稱：大鼠亮氨酰氨基肽酶(LAP)重組蛋白

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

英文名稱：Recombinant Leucine Aminopeptidase (LAP)

LAPEP, LAP3; PEPS; Peptidase S; Leucyl Aminopeptidase; Cytosol aminopeptidase; Proline aminopeptidase; Prolyl aminopeptidase

酶與激酶

代謝通路

發(fā)育科學(xué)

物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)

來源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位：：n/a

預(yù)測分子量：35.1kDa

實際分子量：35.1kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽：Pro206~Arg496 with N-terminal His Tag

緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點：-

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理：

免疫特異性捕獲：抗 LAP 特異性抗體特異性結(jié)合重組 LAP 蛋白抗原區(qū)域，區(qū)別體系內(nèi)其他氨基肽酶同工型。

酶標(biāo)二抗信號耦合：形成夾心免疫復(fù)合物，標(biāo)記酶催化底物發(fā)生顏色變化，光學(xué)信號對應(yīng)蛋白分子豐度。

標(biāo)準(zhǔn)曲線定量換算：LAP 梯度標(biāo)準(zhǔn)品同步反應(yīng)建立線性模型，通過吸光度數(shù)值反推樣本重組蛋白濃度。

封閉阻斷非特異吸附：封閉空余固相結(jié)合位點，減少雜蛋白非特異性黏附，降低檢測背景誤差。
公司正在出售的產(chǎn)品：

常見實驗場景操作指南：

細(xì)胞培養(yǎng)實驗

濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實驗梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測細(xì)胞增殖、分化或信號通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。

添加時機(jī)：細(xì)胞接種后24-48小時，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時添加重組蛋白。

更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。

免疫檢測實驗

陽性對照設(shè)置：在ELISA或WB實驗中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。

封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。

抗體配對：選擇針對不同表位的捕獲抗體和檢測抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

蛋白相互作用實驗

標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實驗，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。

反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。

陰性對照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。