大鼠母系胚胎亮氨酸拉鏈蛋白激酶(MELK)重組蛋白適配細(xì)胞周期調(diào)控、胚胎發(fā)育、腫瘤增殖及激酶抑制劑篩選相關(guān)體外實(shí)驗(yàn)。
型號:YS-DB1660
產(chǎn)品名稱:大鼠母系胚胎亮氨酸拉鏈蛋白激酶(MELK)重組蛋白
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
英文名稱:Recombinant Maternal Embryonic Leucine Zipper Kinase (MELK)
hPK38; Protein kinase Eg3; Tyrosine-protein kinase MELK
酶與激酶
物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
來源:原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)
亞細(xì)胞定位::n/a
預(yù)測分子量:-
實(shí)際分子量:-(差異分析請參閱說明書)
片段與標(biāo)簽:N-terminal His Tag
緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)
性狀:凍干粉
純度:> 97%
等電點(diǎn):-
應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格:10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測原理:

激酶特異性抗體識別:抗體靶向 MELK 重組蛋白亮氨酸拉鏈結(jié)構(gòu)抗原位點(diǎn),排除其他絲蘇氨酸激酶干擾。
夾心免疫酶促信號轉(zhuǎn)化:免疫復(fù)合物酶促底物顯色,吸光度大小正比于重組蛋白含量。
梯度標(biāo)準(zhǔn)品定量校準(zhǔn):MELK 標(biāo)準(zhǔn)品擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線,精確定量待測蛋白樣本。
封閉抑制非特異結(jié)合:封閉固相游離位點(diǎn),降低非特異性吸附導(dǎo)致的背景偏高。
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蛋白復(fù)溶與保存:

1. 復(fù)溶前準(zhǔn)備
實(shí)驗(yàn)環(huán)境:在超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行操作,避免污染
試劑準(zhǔn)備:無菌水、PBS緩沖液或產(chǎn)品說明書指定的復(fù)溶液
工具準(zhǔn)備:無菌移液器、槍頭、離心管
2. 復(fù)溶步驟
短暫離心:將蛋白凍干粉管短暫離心(1000rpm,1min),使管壁和管蓋的蛋白粉末集中到管底
加入復(fù)溶液:按照說明書推薦的體積加入無菌水或指定復(fù)溶液,輕輕吹打混勻,避免渦旋振蕩防止蛋白變性
靜置溶解:室溫靜置5-10分鐘,期間可輕輕顛倒離心管幫助溶解,避免劇烈振蕩
分裝保存:根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要將復(fù)溶后的蛋白分裝成小份(如10μg/份),避免反復(fù)凍融
3. 保存條件
長期保存:-20℃或-80℃避光保存,加入50%甘油可提高穩(wěn)定性
短期保存:4℃可穩(wěn)定保存1-2周,需避免反復(fù)凍融
注意:
避免接觸強(qiáng)氧化劑、強(qiáng)酸強(qiáng)堿環(huán)境
若蛋白出現(xiàn)沉淀或渾濁,可4℃放置或短暫離心后取上清使用
關(guān)鍵字: 大鼠母系胚胎亮氨酸拉鏈蛋白激酶;MELK;重組蛋白;
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