大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白適配內(nèi)皮素生成通路、血管收縮調(diào)控、高血壓病理機(jī)制及酶底物切割活性分析實(shí)驗(yàn)。
型號(hào)：YS-DB2115
產(chǎn)品名稱(chēng)：大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1(ECE1)重組蛋白
物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
英文名稱(chēng)：Recombinant Endothelin Converting Enzyme 1 (ECE1)
酶與激酶
心腦血管
物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
來(lái)源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位：：Cell membrane; Single-pass type II membrane protei
預(yù)測(cè)分子量：30.8kDa
實(shí)際分子量：-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))
片段與標(biāo)簽：His214~Ala448 with
緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.）
性狀：凍干粉
純度：> 95%
等電點(diǎn)：6.0
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理：
蛋白酶亞型特異性識(shí)別：抗體靶向 ECE1 重組蛋白催化結(jié)構(gòu)域抗原位點(diǎn)，區(qū)分 ECE2 同源蛋白。
夾心復(fù)合物酶促顯色反應(yīng)：夾心免疫結(jié)構(gòu)催化底物變色，吸光度與重組蛋白濃度正相關(guān)。
標(biāo)準(zhǔn)曲線定量測(cè)算：ECE1 梯度純品建立線性關(guān)系，精確定量樣本蛋白濃度。
封閉降低非特異背景：封閉固相空白位點(diǎn)，阻斷雜蛋白非特異性黏附干擾基線。
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復(fù)溶操作要點(diǎn)：
復(fù)溶前準(zhǔn)備
工具消毒：移液槍頭、離心管需經(jīng)過(guò)高壓滅菌或一次性無(wú)菌處理，避免引入污染。
緩沖液選擇：優(yōu)先使用產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)推薦的專(zhuān)用復(fù)溶緩沖液，若無(wú)推薦可使用：
基礎(chǔ)型：20mM Tris-HCl（pH7.5）+ 150mM NaCl
保護(hù)型：在基礎(chǔ)緩沖液中添加5%甘油、1mM DTT或0.1% BSA
特殊蛋白：膜蛋白需添加去垢劑（如0.05% Triton X-100），酶類(lèi)需添加輔酶因子
復(fù)溶步驟
短暫離心：將凍干蛋白管置于離心機(jī)，4℃下8000rpm離心30秒，使底部蛋白集中。
緩慢加液：沿管壁緩慢加入適量緩沖液，避免直接沖擊蛋白沉淀。
溫和溶解：輕輕搖晃離心管或用移液槍緩慢吹吸，禁止渦旋振蕩（易導(dǎo)致蛋白變性）。
靜置溶解：4℃靜置10-30分鐘，難溶蛋白可延長(zhǎng)至1小時(shí)，期間每隔10分鐘輕輕混勻一次。
關(guān)鍵字： 大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化酶1;ECE1;重組蛋白;
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