大鼠蘋果酸脫氫酶1(MDH1)重組蛋白用于胞質(zhì)蘋果酸代謝、糖脂代謝互作、氧化還原穩(wěn)態(tài)及腫瘤能量重編程研究實(shí)驗(yàn)。
型號(hào)：YS-DB1662
產(chǎn)品名稱：大鼠蘋果酸脫氫酶1(MDH1)重組蛋白
物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
英文名稱：Recombinant Malate Dehydrogenase 1 (MDH1)
MDHA; Malate Dehydrogenase 1,NAD(Soluble); Cytosolic malate dehydrogenase; Diiodophenylpyruvate reductase
酶與激酶
物種：Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
來源：原核表達(dá)
宿主E.coli
內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)
亞細(xì)胞定位：：細(xì)胞質(zhì)
預(yù)測(cè)分子量：66.3kDa
實(shí)際分子量：66kDa(差異分析請(qǐng)參閱說明書)
片段與標(biāo)簽：Ser2~Ala334 with N-terminal His and GST Tag
緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液（pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300）
性狀：凍干粉
純度：> 90%
等電點(diǎn)：6.2
應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.
規(guī)格：10μg、50μg、200μg、1mg、5mg
檢測(cè)原理：
同工型特異性區(qū)分：抗 MDH1 抗體識(shí)別胞質(zhì)型 MDH1 重組蛋白抗原，區(qū)別線粒體 MDH2。
夾心免疫酶促信號(hào)放大：免疫復(fù)合物攜帶標(biāo)記酶，底物顯色生成定量吸光度數(shù)值。
梯度標(biāo)準(zhǔn)品線性定量：MDH1 標(biāo)準(zhǔn)品構(gòu)建濃度 - 信號(hào)曲線，測(cè)算重組蛋白濃度。
封閉阻斷非特異吸附：封閉固相空白位點(diǎn)，抑制雜蛋白非特異性結(jié)合。
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常見實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景操作指南：
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
濃度優(yōu)化：先設(shè)置預(yù)實(shí)驗(yàn)梯度（如0.1ng/mL、1ng/mL、10ng/mL、100ng/mL），檢測(cè)細(xì)胞增殖、分化或信號(hào)通路激活情況，確定最優(yōu)工作濃度。
添加時(shí)機(jī)：細(xì)胞接種后24-48小時(shí)，待細(xì)胞貼壁且狀態(tài)穩(wěn)定時(shí)添加重組蛋白。
更換培養(yǎng)基：若蛋白半衰期較短，需每隔24-48小時(shí)更換含新鮮蛋白的培養(yǎng)基。
免疫檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
陽性對(duì)照設(shè)置：在ELISA或WB實(shí)驗(yàn)中，用已知濃度的重組蛋白制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，確保定量準(zhǔn)確性。
封閉處理：若蛋白用于包被ELISA板，包被后需用5%脫脂牛奶或BSA封閉，降低非特異性結(jié)合。
抗體配對(duì)：選擇針對(duì)不同表位的捕獲抗體和檢測(cè)抗體，避免與重組蛋白的標(biāo)簽產(chǎn)生交叉反應(yīng)。
蛋白相互作用實(shí)驗(yàn)
標(biāo)簽選擇：若使用Pull-down實(shí)驗(yàn)，優(yōu)先選擇GST或His標(biāo)簽的重組蛋白，便于親和層析分離。
反應(yīng)條件：在生理緩沖液（如PBS）中進(jìn)行，溫度控制在4℃，避免蛋白變性。
陰性對(duì)照：設(shè)置不含目標(biāo)蛋白的對(duì)照組，排除標(biāo)簽非特異性結(jié)合的干擾。
關(guān)鍵字： 大鼠蘋果酸脫氫酶1;MDH1;重組蛋白;
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