本試劑盒采用競(jìng)爭(zhēng)性ELISA檢測(cè)原理，基于大鼠VK1的特異性免疫反應(yīng)實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。酶標(biāo)板預(yù)先包被VK1抗原，待測(cè)樣本中的VK1與固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合對(duì)應(yīng)的特異性抗體，孵育反應(yīng)后洗滌去除游離物質(zhì)，加入酶標(biāo)記二抗和顯色底物進(jìn)行顯色反應(yīng)。產(chǎn)物吸光度與樣本VK1濃度呈負(fù)相關(guān)，參照標(biāo)準(zhǔn)曲線即可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中維生素K1的含量。
基本參數(shù)?：
產(chǎn)品名稱：大鼠維生素K1(VK1)ELISA試劑盒
英文名稱：VK1 ELISA Kit
貨號(hào)：Y-E1468
規(guī)格：48T/96T
靈敏度：最低檢測(cè)濃度≤0.04ng/mL
檢測(cè)范圍：0.08ng/mL - 4ng/mL
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)130分鐘，分步孵育70分鐘、40分鐘，顯色20分鐘
保存條件：2-8℃嚴(yán)格避光冷藏，所有試劑禁止冷凍
有效期：未開封8個(gè)月，開封后15天內(nèi)完成實(shí)驗(yàn)
特異性：專一識(shí)別大鼠VK1，與VK2、VK3無(wú)交叉反應(yīng)，種屬特異性高
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%
注意事項(xiàng)：VK1光敏性極強(qiáng)，所有操作需在弱光環(huán)境下進(jìn)行；樣本需無(wú)凝血、無(wú)溶血，保證檢測(cè)準(zhǔn)確性。
試劑盒組成：
預(yù)包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標(biāo)物
標(biāo)準(zhǔn)品 6支/套 制備標(biāo)準(zhǔn)曲線，定量檢測(cè)依據(jù)
生物素標(biāo)記抗體/抗原 1瓶 識(shí)別并結(jié)合目標(biāo)物，提供酶結(jié)合位點(diǎn)
辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應(yīng)底物，產(chǎn)生顏色變化
終止液 1瓶 終止酶促反應(yīng)，穩(wěn)定顯色結(jié)果
濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)
封板膜 2張 孵育過(guò)程中防止污染和揮發(fā)
實(shí)驗(yàn)步驟如下：
酶標(biāo)板室溫靜置 26min，倍比稀釋 VK1 標(biāo)準(zhǔn)品，樣本按照說(shuō)明書比例稀釋，每孔加樣 50μL，空白孔只加稀釋液。
加入酶標(biāo)記工作液 50μL，封板膜封口，37℃孵育 66min。
洗板 5 次，每孔洗液浸潤(rùn) 30s，倒掉液體后用力拍干。
顯色 A 液、B 液各 50μL 添加混勻，避光 37℃顯色 17min。
加入終止液 50μL 終止酶促顯色。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定各孔吸光度。
繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本 VK1 實(shí)際含量。
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關(guān)鍵字： 大鼠維生素K1;VK1;ELISA試劑盒;
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