本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗原理，預先將純化的大鼠膀胱腫瘤抗原（BTA）特異性抗體包被于酶標板微孔內(nèi)，形成固相抗體。實驗過程中，樣本、標準品中的大鼠BTA會與固相抗體特異性結(jié)合，充分孵育洗滌后，加入酶標記的檢測抗體，形成固相抗體-抗原-酶標抗體的免疫復合物。經(jīng)過徹底洗板去除未結(jié)合的游離物質(zhì)后，加入底物液進行顯色反應，在酶的催化下底物產(chǎn)生有色產(chǎn)物，最后加入終止液終止反應，通過酶標儀測定對應波長下的吸光度值，吸光度值與樣本中大鼠BTA的含量呈正相關，結(jié)合標準曲線即可精準計算出樣本中BTA的濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測靈敏度可達0.15ng/mL，可精準捕捉樣本中微量BTA表達，無假陰性檢測偏差。

檢測范圍：0.3ng/mL - 8ng/mL，覆蓋大鼠生理及病理狀態(tài)下膀胱腫瘤抗原常規(guī)表達區(qū)間，適配多數(shù)實驗樣本檢測需求。

反應時間：整體實驗操作時長90分鐘，包含溫育、洗板、顯色、終止全流程，無需過夜孵育。

保存條件：試劑盒未開封組分2 - 8℃冷藏保存，嚴禁冷凍；開封后酶標板密封避光2 - 8℃存放，避免受潮污染。

有效期：未開封原裝試劑盒有效期6個月，嚴格按保存條件存放可保證試劑活性穩(wěn)定。

特異性：特異性識別大鼠BTA抗原，與大鼠其他腫瘤標志物、膀胱組織常規(guī)蛋白無交叉反應，檢測特異性強。

重復性：板內(nèi)變異系數(shù)CV≤6%，板間變異系數(shù)CV≤8%，實驗重復性良好，數(shù)據(jù)波動小。

注意事項：實驗樣本需避免溶血、脂血，渾濁樣本需提前離心澄清；溫育過程需嚴格避光，溫度恒定在37℃；洗板需徹底，避免殘留洗液影響顯色結(jié)果。
試劑盒組成：

預包被抗體/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕獲抗體/抗原，結(jié)合目標物

標準品 6支/套 制備標準曲線，定量檢測依據(jù)

生物素標記抗體/抗原 1瓶 識別并結(jié)合目標物，提供酶結(jié)合位點

辣根過氧化物酶（HRP）標記親和素 1瓶 與生物素結(jié)合，催化底物顯色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作為酶促反應底物，產(chǎn)生顏色變化

終止液 1瓶 終止酶促反應，穩(wěn)定顯色結(jié)果

濃縮洗滌液 1瓶 清洗微孔板，去除未結(jié)合物質(zhì)

封板膜 2張 孵育過程中防止污染和揮發(fā)

公司正在出售的產(chǎn)品：

實驗操作流程：

1. 提前將試劑盒所有試劑、待測樣本從冷藏環(huán)境取出，室溫平衡 30min；濃縮洗滌液按說明書比例用蒸餾水稀釋配制備用。

2. 取出酶標板，設定空白孔、標準品孔、待測樣本孔，標準品孔依次加入梯度稀釋后的 BTA 標準品 50μL，樣本孔加入稀釋后待測上清 / 血清樣本 50μL，空白孔不加任何液體。

3. 每孔直接加入酶標記結(jié)合工作液 100μL（一步法無需預先孵育包被，同步加酶結(jié)合物），封板膜密封酶標板。

4. 置于 37℃恒溫孵育箱避光孵育 60min，全程避免酶標板受熱不均與強光直射。

5. 小心揭去封板膜，棄去孔內(nèi)全部液體，每孔加滿稀釋后洗滌液，浸泡 30s 后甩干，重復洗板 5 次，最后一次拍干孔內(nèi)殘留液體。

6. 所有孔依次加入顯色液 A 液 50μL、顯色液 B 液 50μL，輕柔震蕩混勻，37℃避光顯色 15min。

7. 每孔立即加入終止液 50μL 終止顯色反應，酶標儀設置 450nm 波長，15min 內(nèi)讀取各孔 OD 吸光度值，根據(jù)標準曲線計算樣本 BTA 濃度。