本試劑盒基于競(jìng)爭(zhēng)法酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，將大鼠皮質(zhì)醇（Cortisol）抗原包被于酶標(biāo)板固相載體上。檢測(cè)時(shí)，樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的內(nèi)源性皮質(zhì)醇會(huì)與板上包被的固相抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合特異性酶標(biāo)抗體，孵育反應(yīng)后通過(guò)洗滌去除未結(jié)合的組分。隨后加入底物顯色液，結(jié)合的酶標(biāo)抗體可催化底物發(fā)生顯色反應(yīng)，顯色深淺與樣本中皮質(zhì)醇的含量呈負(fù)相關(guān)，即樣本中皮質(zhì)醇濃度越高，競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合的酶標(biāo)抗體越少，顯色越淺。反應(yīng)終止后測(cè)定吸光度，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可定量檢測(cè)大鼠樣本中皮質(zhì)醇的含量。
產(chǎn)品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測(cè)限值0.08ng/mL，可精準(zhǔn)檢測(cè)大鼠血清、血漿中極低濃度皮質(zhì)醇含量。

檢測(cè)范圍：0.2ng/mL - 20ng/mL，適配大鼠應(yīng)激、內(nèi)分泌紊亂等不同模型的皮質(zhì)醇水平檢測(cè)。

反應(yīng)時(shí)間：全流程反應(yīng)時(shí)長(zhǎng)120分鐘，分兩次37℃溫育，分步完成抗原抗體結(jié)合與顯色反應(yīng)。

保存條件：所有試劑組分2 - 8℃避光冷藏，酶標(biāo)板拆封后剩余孔板用封口膜密封，防止揮發(fā)、污染。

有效期：原裝未拆封試劑盒有效期12個(gè)月，長(zhǎng)期保存需避免溫度波動(dòng)。

特異性：僅特異性結(jié)合大鼠皮質(zhì)醇，與皮質(zhì)酮、醛固酮等同類甾體激素交叉反應(yīng)率＜1%，特異性極高。

重復(fù)性：板內(nèi)CV≤5%，板間CV≤7%，平行樣本檢測(cè)數(shù)據(jù)一致性高。

注意事項(xiàng)：血漿樣本需采用EDTA抗凝，不可使用肝素抗凝；樣本采集后需低溫離心分離，避免激素降解；顯色時(shí)間需嚴(yán)格統(tǒng)一，防止讀數(shù)偏差。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：

實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異

所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）

避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用

洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果

顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果

公司正在出售的產(chǎn)品：

實(shí)驗(yàn)操作流程：

1. 試劑盒組分室溫復(fù)溫 25min，濃縮洗滌液定容稀釋；血清樣本室溫融化，低速離心去除雜質(zhì)沉淀。

2. 酶標(biāo)板分區(qū)標(biāo)記孔位，標(biāo)準(zhǔn)品孔添加系列濃度 Cortisol 標(biāo)準(zhǔn)品 50μL，樣本孔加入預(yù)處理大鼠血清樣本 50μL，空白孔空置不加樣。

3. 一步法直接向除空白孔外所有孔加入酶偶聯(lián)抗體工作液 100μL，封板膜嚴(yán)實(shí)封口防止液體揮發(fā)。

4. 37℃恒溫環(huán)境避光孵育 45min，孵育期間不可隨意挪動(dòng)酶標(biāo)板位置。

5. 掀開(kāi)封板膜，倒扣棄液，每孔注滿洗滌液靜置 25s，反復(fù)洗板 4 次，吸水紙徹底拍干微孔殘留洗液。

6. 按順序每孔加入顯色底物 A、B 各 50μL，輕晃酶標(biāo)板混勻，37℃避光避光顯色 12min。

7. 加入終止液 50μL 終止反應(yīng)，混勻后即刻用酶標(biāo)儀 450nm 測(cè) OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線換算皮質(zhì)醇含量。