一、核心光學(xué)參數(shù)
TJ-647N的熒光在 625 - 660 nm 范圍內(nèi)被高效激發(fā)：
參數(shù) | 數(shù)值 | 備注 |
最大吸收波長 (λabs) | 646 nm | 部分供應(yīng)商數(shù)據(jù)為647 nm |
最大摩爾吸光系數(shù) (εmax) | 1.5 × 10? M?1cm?1 | 光吸收能力極強 |
最大發(fā)射波長 (λfl) | 664 nm | 部分供應(yīng)商數(shù)據(jù)為663 nm |
熒光量子產(chǎn)率 (ηfl) | ~65% | 遠(yuǎn)高于標(biāo)準(zhǔn)版ATTO 647 (~30%) |
熒光壽命 (τfl) | 3.5 ns | 無 |
CF??? / CF??? | 0.04 / 0.03 | 用于校正標(biāo)記蛋白在260/280nm的紫外吸收 |
凈電荷 (偶聯(lián)后) | +1 (陽離子) | 有助于提高水溶性 |
斯托克斯位移 | ~18 nm | 無 |
二、核心特點與優(yōu)勢
1、超高光穩(wěn)定性：抗光漂白能力遠(yuǎn)超Cy5等傳統(tǒng)染料，非常適合長時間的活細(xì)胞成像和超分辨率顯微鏡技術(shù)。
2、高熒光量子產(chǎn)率 (65%)：提供明亮且清晰的熒光信號。
3、優(yōu)異的臭氧穩(wěn)定性：對大氣臭氧具有極高的穩(wěn)定性，這使其在微陣列等應(yīng)用中特別有價值。
4、pH不敏感性：在pH 2至11的廣泛范圍內(nèi)，其吸收和熒光特性保持穩(wěn)定。
5、低三線態(tài)形成率：這一特性使其非常適合單分子檢測。
6、由兩種異構(gòu)體組成：這兩種異構(gòu)體的吸收和熒光特性幾乎完全相同，確保批次間的一致性。
三、特別注意事項：熒光猝滅
TJ-647N是一個強電子受體，其熒光可能被鳥嘌呤（Guanine）、色氨酸（Tryptophan） 等電子供體有效猝滅。在標(biāo)記富含這些氨基酸的蛋白質(zhì)或核酸時，需評估潛在的熒光損失。
四、主要應(yīng)用領(lǐng)域
1、超分辨率顯微鏡技術(shù)：非常適用于SIM、STED、PALM、dSTORM等超分辨成像。
2、單分子檢測：低三線態(tài)率和高亮度使其成為單分子研究的利器。
3、流式細(xì)胞術(shù) (FACS)。
4、熒光原位雜交 (FISH)。
5、活體成像：其紅色至近紅外熒光具有更低的背景干擾和更強的組織穿透能力。
6、微陣列：優(yōu)異的臭氧穩(wěn)定性使其非常適合微陣列等高通量檢測平臺。
7、多色熒光實驗：可與綠色（如TJ-488）和遠(yuǎn)紅色（如TJ-700）染料組合使用。
五、主要產(chǎn)品形式與應(yīng)用
TJ-647N提供多種活性衍生物，可通過不同化學(xué)方式與目標(biāo)分子偶聯(lián)：
產(chǎn)品形式 | 主要應(yīng)用 |
NHS酯 (NHS Ester) | 最常用。用于標(biāo)記蛋白質(zhì)、抗體、多肽等分子中的伯氨基(-NH?) |
羧酸 (Carboxylic Acid) | 基礎(chǔ)結(jié)構(gòu)形式，用作參比標(biāo)準(zhǔn)品或合成前體 |
馬來酰亞胺 (Maleimide) | 特異性地標(biāo)記蛋白質(zhì)或多肽中的巰基(-SH) |
碘乙酰胺 (Iodoacetamide) | 用于標(biāo)記巰基(-SH) |
點擊化學(xué)衍生物 | 包括DBCO、炔烴 (Alkyne)、疊氮化物 (Azide)等 |
磷脂 (Phospholipid) | 如DMPE和DOPE，用于研究生物膜結(jié)構(gòu) |
鬼筆環(huán)肽 (Phalloidin) | 特異性標(biāo)記F-肌動蛋白，用于細(xì)胞骨架研究 |
生物素 (Biotin) | 提供生物素化標(biāo)記 |
六、使用與儲存建議
1、儲存條件：作為固體，應(yīng)在 -20°C 下干燥、避光保存。
2、溶解性：NHS酯等衍生物可溶于DMF、DMSO等有機溶劑。
3、標(biāo)記反應(yīng)：NHS酯與氨基的反應(yīng)通常在pH 8.3的碳酸氫鈉緩沖液或pH 7.5–8.5的HEPES緩沖液中進(jìn)行。
4、注意事項：所有操作需嚴(yán)格避光。NHS酯衍生物對水敏感，應(yīng)避免接觸水分；含伯氨基的緩沖液（如Tris、甘氨酸）會抑制反應(yīng)。
關(guān)鍵字： 新型熒光染料;
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