本試劑盒基于熒光PCR檢測技術,特異性靶向光滑念珠菌保守基因序列,可精準檢測動物黏膜組織、分泌物、環(huán)境樣本中的真菌核酸。光滑念珠菌為常見條件致病性真菌,易引發(fā)畜禽淺表及深部真菌感染,耐藥性較強,試劑盒可實現(xiàn)快速精準鑒定,區(qū)分其他念珠菌。適用于畜禽真菌感染確診、病原分型、耐藥防控及養(yǎng)殖環(huán)境真菌監(jiān)測。
產(chǎn)品名稱 | 光滑念珠菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013980 |
英文名稱 | Candida glabrataPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎原理:

血液、分泌物真菌 DNA qPCR,靶向光滑念珠菌 ITS 特異性序列,熒光探針檢出深部感染真菌。
普通 PCR 擴增念珠菌特異 18S rRNA 基因,電泳區(qū)分克柔、熱帶念珠菌。
磁珠富集血液微量真菌核酸,解決血液蛋白抑制 PCR 擴增問題。
?操作步驟?:

1. DNA提取(樣本制備區(qū))
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA,建議濃度≥10 ng/μL,A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備(獨立操作區(qū))
標記6管為梯度稀釋點(如7-2),每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋,混勻后作為標準品(避免污染)。
3. PCR反應體系配制(試劑配制區(qū))
按以下比例配制(示例):
| 組分 | 體積(μL) |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設置:預變性95℃ 3 min;40循環(huán)(95℃ 10 s, 60℃ 30 s);熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析:根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
?注意事項?:

1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴格劃分三個獨立區(qū)域:?試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?,各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴禁混用?,防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭,每步更換槍頭;
陽性對照操作應在專用生物安全柜中進行,避免污染其他試劑;
加樣后立即蓋緊管蓋,避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?,避免反復凍融,確保穩(wěn)定性;
使用前于冰上解凍并輕柔混勻,瞬時離心后使用。
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關鍵字: 光滑念珠菌;PCR檢測試劑盒;
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