?產(chǎn)品名稱：禽致病性大腸桿菌血清型PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Avian Pathogenicity Escherichia coli(APEC) O1PCR
貨號(hào)：YS-P013850
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測(cè)原理：
引物分別靶向不同致病性大腸桿菌毒力基因（O、H 血清型特異性基因），依據(jù)擴(kuò)增條帶組合區(qū)分致病性血清型與普通共生大腸桿菌。
配套細(xì)菌基因組快速提取緩沖液，無(wú)需高速離心，煮沸法即可釋放細(xì)菌 DNA，適配糞便、禽泄殖腔拭子粗樣本。
內(nèi)置陰性對(duì)照菌 DNA、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品雙對(duì)照，同步監(jiān)控?cái)U(kuò)增體系失效、樣本交叉污染兩類檢測(cè)誤差。
實(shí)驗(yàn)流程：
1. 樣本處理
提取待測(cè)樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（示例：6個(gè)梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號(hào)），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)），共40循環(huán)。
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注意事項(xiàng)：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽(yáng)性對(duì)照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無(wú)菌原則，運(yùn)輸時(shí)使用干冰或冰袋保存。
關(guān)鍵字： 禽致病性大腸桿菌血清型;PCR檢測(cè)試劑盒;
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