本試劑盒基于熒光PCR檢測技術(shù)，專為犬諾瓦克病毒核酸定性檢測研發(fā)，適配犬糞便、腸道組織等各類臨床樣本。試劑盒依托特異性引物探針設(shè)計(jì)，可精準(zhǔn)識(shí)別犬諾瓦克病毒保守基因片段，有效規(guī)避犬類其他腸道病毒的交叉干擾，特異性極強(qiáng)。檢測流程簡便高效，可快速完成樣本核酸擴(kuò)增與結(jié)果判讀，解決傳統(tǒng)病原分離檢測周期長、檢出率低的問題，適用于犬類急性腸胃炎、群體性腸道疫病的快速篩查、病因確診及養(yǎng)殖場景的疫病溯源監(jiān)測，為犬類腸道傳染病防控提供精準(zhǔn)的分子診斷依據(jù)。
產(chǎn)品名稱 | 犬諾瓦克病毒PCR檢測試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P013986 |
英文名稱 | Canine Norovirus PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
試劑盒提取犬糞便、嘔吐物樣本總核酸，采用病毒特異性保守基因引物，經(jīng) Taq 酶介導(dǎo)普通 PCR 擴(kuò)增犬諾瓦克病毒靶基因片段，瓊脂糖電泳條帶判定陽性結(jié)果。
依托實(shí)時(shí)熒光定量 PCR（qPCR）技術(shù)，引物探針靶向病毒衣殼蛋白編碼區(qū)，擴(kuò)增過程同步釋放熒光信號(hào)，依靠 Ct 值定量樣本內(nèi)病毒載量。
采用反轉(zhuǎn)錄 PCR（RT-PCR）原理，先將病毒 RNA 反轉(zhuǎn)錄為 cDNA，再進(jìn)行特異性擴(kuò)增，僅識(shí)別諾瓦克病毒 RNA 模板，排除 DNA 雜質(zhì)交叉干擾。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸?。?/span>
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測，禁止人體臨床檢測；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 犬諾瓦克病毒;PCR檢測試劑盒;
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