本試劑盒為封閉毛細(xì)線蟲(chóng)專屬核酸檢測(cè)試劑，采用成熟PCR擴(kuò)增技術(shù)，靶向檢測(cè)樣本中封閉毛細(xì)線蟲(chóng)的特征性核酸序列。封閉毛細(xì)線蟲(chóng)多寄生于畜禽消化道，慢性感染會(huì)導(dǎo)致畜禽消瘦、生長(zhǎng)遲緩，傳統(tǒng)檢測(cè)易出現(xiàn)漏檢、誤判。本試劑盒特異性高、抗樣本雜質(zhì)干擾能力強(qiáng)，可適配各類臨床樣本檢測(cè)，操作流程標(biāo)準(zhǔn)化，無(wú)需復(fù)雜實(shí)驗(yàn)條件，能夠快速完成批量樣本檢測(cè)，適用于基層動(dòng)物檢測(cè)站點(diǎn)、規(guī)?；B(yǎng)殖場(chǎng)的封閉毛細(xì)線蟲(chóng)感染篩查與確診，有效彌補(bǔ)傳統(tǒng)寄生蟲(chóng)檢測(cè)方法的短板。
產(chǎn)品名稱 | 封閉毛細(xì)線蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P013990 |
英文名稱 | Capillaria obsignataPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
選取封閉毛細(xì)線蟲(chóng) 18S rRNA 保守基因設(shè)計(jì)引物，樣本蟲(chóng)體 DNA 純化后普通 PCR 擴(kuò)增，電泳條帶作為陽(yáng)性判定依據(jù)。
探針?lè)晒舛?/span> PCR，僅與封閉毛細(xì)線蟲(chóng)靶序列互補(bǔ)結(jié)合，實(shí)時(shí)采集熒光數(shù)值，精準(zhǔn)區(qū)分微量蟲(chóng)卵感染樣本。
反轉(zhuǎn)錄輔助 DNA 擴(kuò)增法，去除樣本中抑制雜質(zhì)后特異性擴(kuò)增封閉毛細(xì)線蟲(chóng)基因組，規(guī)避腸道雜菌 DNA 干擾。
?操作步驟?：
RNA提取：使用配套試劑或商業(yè)試劑盒提取樣品RNA。
反應(yīng)配制：按說(shuō)明書(shū)比例混合預(yù)混液、引物探針、模板RNA及對(duì)照。
PCR擴(kuò)增：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40個(gè)循環(huán)），于FAM通道采集信號(hào)。
結(jié)果分析：通過(guò)Ct值判定病毒含量，陽(yáng)性對(duì)照需出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無(wú)信號(hào)。
?注意事項(xiàng)?：
試劑禁止反復(fù)凍融，分裝為小體積 - 20℃保存，融化后冰上放置不超過(guò) 2 h
所有耗材必須無(wú) DNase/RNase，吸頭一次性使用，廢液、廢棄 PCR 管 121℃高壓滅菌后丟棄
陽(yáng)性質(zhì)粒高拷貝，開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
試劑盒僅限科研檢測(cè)，禁止人、臨床樣本檢測(cè)
試劑盒過(guò)期、試劑渾濁、變色禁止使用
若大量樣本出現(xiàn)陰性對(duì)照帶污染，立即更換全新試劑盒，徹底紫外消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器
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