本試劑盒采用特異性熒光PCR技術(shù)，專(zhuān)注檢測(cè)流產(chǎn)嗜衣原體核酸，適配畜禽生殖道分泌物、胎盤(pán)、胎兒組織等樣本。流產(chǎn)嗜衣原體是引發(fā)牛羊等畜禽流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎的重要病原，傳染性強(qiáng)，可造成規(guī)?；B(yǎng)殖重大經(jīng)濟(jì)損失，且存在人畜共患風(fēng)險(xiǎn)。本試劑盒靈敏度高，可精準(zhǔn)檢出隱性感染樣本，提前排查帶毒畜禽，檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)穩(wěn)定，適用于畜禽繁育基地疫病凈化、母畜流產(chǎn)病因確診、養(yǎng)殖區(qū)域疫病監(jiān)測(cè)等場(chǎng)景。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 流產(chǎn)嗜衣原體PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014009 |
英文名稱(chēng) | Chlamydophila abortus PCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
牛羊流產(chǎn)胎兒組織核酸提取，靶向流產(chǎn)嗜衣原體 ompA 特異性引物 PCR，電泳條帶判定病原。
TaqMan 特異性熒光 PCR，探針僅結(jié)合流產(chǎn)嗜衣原體特有基因，區(qū)分鸚鵡熱、貓嗜衣原體近緣菌種。
直接拭子粗提 PCR，牛羊陰道拭子無(wú)需純化，直接擴(kuò)增病原靶基因，適配大規(guī)模流產(chǎn)篩查。
?操作步驟?：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（獨(dú)立操作區(qū)）
標(biāo)記6管為梯度稀釋點(diǎn)（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽(yáng)性對(duì)照依次稀釋?zhuān)靹蚝笞鳛闃?biāo)準(zhǔn)品（避免污染）。
3. PCR反應(yīng)體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機(jī)檢測(cè)
程序設(shè)置：預(yù)變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
?注意事項(xiàng)?：
1、實(shí)驗(yàn)分區(qū)管理?
實(shí)驗(yàn)全程需嚴(yán)格劃分三個(gè)獨(dú)立區(qū)域：?試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴(kuò)增區(qū)?，各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、移液器及耗材?嚴(yán)禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽(yáng)性對(duì)照操作應(yīng)在專(zhuān)用生物安全柜中進(jìn)行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴(kuò)散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復(fù)凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時(shí)離心后使用。
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