本試劑盒針對(duì)新兇手弗朗西斯菌特異性基因設(shè)計(jì)PCR檢測(cè)體系，可精準(zhǔn)檢出環(huán)境、生物樣本中的致病菌核酸。試劑盒特異性強(qiáng)，可精準(zhǔn)區(qū)分該菌種與弗朗西斯菌屬其他菌株，靈敏度高，適用于病原監(jiān)測(cè)、食品安全檢測(cè)、人畜共患病風(fēng)險(xiǎn)排查。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 新兇手弗朗西斯菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014210 |
英文名稱(chēng) | Francisella novicidaPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
擴(kuò)增新兇手弗朗西斯菌脂蛋白基因，區(qū)分土拉熱弗朗西斯菌
水源、蜱蟲(chóng)、動(dòng)物組織樣本提取胞內(nèi)菌 DNA，去除環(huán)境雜質(zhì)
熒光定量特異性擴(kuò)增，鑒別低致病性弗朗西斯菌污染
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽(yáng)性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；
陰性：無(wú)Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過(guò) 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開(kāi)蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過(guò)期禁止使用
僅限科研檢測(cè)，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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