?產(chǎn)品名稱：超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌PCR檢測試劑盒
英文名稱：ESBLEscherichia coliβPCR
貨號(hào)：YS-P014176
分類：PCR檢測試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測原理：
靶向 CTX-M、TEM 超廣譜耐藥基因，檢出產(chǎn)耐藥酶致病性大腸桿菌
糞便、污水樣本富集細(xì)菌后提取基因組 DNA，去除雜菌核酸干擾
多重引物同步擴(kuò)增多種 ESBL 耐藥基因，一次性篩查多重耐藥菌株
實(shí)驗(yàn)流程：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
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注意事項(xiàng)：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)粒拷貝數(shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
關(guān)鍵字： 超廣譜內(nèi)酰胺酶大腸埃希菌;PCR檢測試劑盒;
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