大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞
產(chǎn)品信息：
英文名稱：Rat Pulmonary Microvascular Endothelial Cells
組織來源：肺組織
默認種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
產(chǎn)品名稱 | 大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞 | 組織來源 | 肺組織 |
英文名稱 | Rat Pulmonary Microvascular Endothelial Cells | 貨號 | A01X1515 |
方法簡介 公司實驗室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮采用組織貼塊法并結(jié)合內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的大鼠肺微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
細胞簡介：
大鼠肺微血管內(nèi)皮分離自肺組織；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔，左右各一，覆蓋于心之上。肺有分葉，左二右三，共五葉。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉、鼻相連，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅。微血管內(nèi)皮細胞密切參與包括再生、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應(yīng)。細胞呈梭形或多角形，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內(nèi)皮細胞構(gòu)成半選擇性屏障，該屏障對于肺氣體交換，調(diào)節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質(zhì)之間的流動具有重要意義。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞培養(yǎng)操作：
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細胞或細胞團，形成細胞懸液進行培養(yǎng)，細胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細胞團或單個細胞時，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀，進行細胞計數(shù)，并調(diào)整細胞密度至實驗所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO 培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
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實驗注意點：
代數(shù)控制：盡量在低代數(shù)（如P3-P10）進行實驗，以防止因傳代過多導(dǎo)致的遺傳漂移或功能衰退。
操作輕柔：原代細胞對環(huán)境變化敏感，解凍和傳代時需格外小心，避免機械損傷。
營養(yǎng)需求：它們往往需要更復(fù)雜的營養(yǎng)成分（如特定的生長因子、血清），普通的培養(yǎng)基可能無法滿足其生長需求。
關(guān)鍵字： 大鼠肺微血管內(nèi)皮細胞;肺組織;貼壁;
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