大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞
產(chǎn)品信息：
英文名稱 | Rat Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells | 種屬 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號 | A01X1663 |
組織來源 | 骨髓 | 生長特性 | 貼壁 |
細胞簡介：
大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（BMSC）分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。出生時，紅骨髓充滿全身骨髓腔，隨著年齡增大，脂肪細胞增多，相當部分紅骨髓被黃骨髓取代，后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓。骨髓基質(zhì)系統(tǒng)內(nèi)存在的骨髓間充質(zhì)干細胞是一種除造血干細胞以外的、具有高度自我更新能力和多向分化潛能的干細胞，可以向骨、軟骨、肌組織、皮膚、脂肪、神經(jīng)等多種組織分化，因此可以作為組織工程中的種子細胞。在骨髓中，BMSC占骨髓有核細胞總數(shù)的0.001%-0.1%，含量極低。骨髓間充質(zhì)干細胞的體外培養(yǎng)條件要求較高，在培養(yǎng)過程中，受貼壁時間、種植密度、血清含量、培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)基pH值等條件的影響。
方法簡介 公司實驗室分離的大鼠骨髓間充質(zhì)干采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結(jié)合培養(yǎng)基篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實驗室分離的大鼠骨髓間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
關(guān)鍵操作技巧與注意事項：
成功的原代培養(yǎng)依賴于嚴謹?shù)募毠?jié)控制：
嚴格無菌操作：這是實驗成功的基石。所有操作需在生物安全柜中進行，試劑和耗材必須無菌。
保持靜置：細胞接種后的最初24-48小時內(nèi)，應(yīng)保持培養(yǎng)瓶絕對靜置，避免頻繁取出觀察或晃動，這有助于細胞貼壁和伸展。
優(yōu)化消化過程：
消化時間要恰到好處，過長會損傷細胞，過短則細胞分散不佳。
膠原酶對組織的損傷較小，常用于分離活性要求高的細胞；胰蛋白酶作用較強，需嚴格控制時間。
酶液應(yīng)新鮮配制，避免活性下降。
控制接種密度：原代細胞在低密度下不易存活，建議適當提高初始接種密度，以保證細胞間的相互作用促進其生長。
定期換液：根據(jù)培養(yǎng)基顏色變化（如變黃）或每隔2-3天更換一次培養(yǎng)液，以清除代謝廢物并補充營養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人β甘露糖苷酶(β Manase)PCR檢測試劑盒 | SEPT14 細胞分化蛋白SEPT14抗體 |
豬白介素1(IL-1)核酸檢測試劑盒 | BRD1蛋白抗體 |
小鼠活化蛋白C(APC)核酸檢測試劑盒 | AF680標記的磷酸化雷帕霉素靶蛋白抗體 |
大鼠黑素瘤抑制性活性蛋白1(MIA1)PCR檢測試劑盒 | PGAM5 絲氨酸/蘇氨酸蛋白磷酸酶PGAM5抗體 |
小鼠5核苷酸酶(5-NT)核酸檢測試劑盒 | 絲氨酸/精氨酸相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體 |
黑色素瘤抑制活性蛋白抗體 | NUSAP1 核仁和紡錘體相關(guān)蛋白1抗體 |
TRAP80 MED17抗體 | 小鼠白細胞介素1α(IL-1α/IL-1F1)PCR檢測試劑盒 |
磷酸化神經(jīng)細胞特異性微管蛋白抗體 | 大鼠5'-核苷酸酶,胞膜(NT5E/CD73)PCR檢測試劑盒 |
RAN結(jié)合蛋白16抗體 | 人泛素蛋白(Ub)核酸檢測試劑盒 |
E2F3 轉(zhuǎn)錄因子E2F-3抗體 | 大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)PCR檢測試劑盒免費代測 |
Beta arrestin 2 β-抑制蛋白2抗體/β休止蛋白2/β-arrestin抗體 | 人15-羥基前列腺素脫氫酶(15-PGDH)核酸檢測試劑盒 |
GADD45G抗體 | 小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)PCR檢測試劑盒 |
Ran 雄激素受體相關(guān)蛋白24抗體 | 大鼠表面活性物質(zhì)關(guān)聯(lián)蛋白B(SPB)PCR檢測試劑盒 |
人類免疫缺陷病毒2型/2型艾滋病病毒gp41+gp160抗體 | USP2 泛素羧基末端水解酶2單克隆抗體 |
大鼠胰島細胞 | 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞Rat Thymic Epithelial Cells |
兔結(jié)腸粘膜上皮細胞 | Rabbit gastric fibroblasts |
細胞培養(yǎng)操作
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細胞或細胞團，形成細胞懸液進行培養(yǎng)，細胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當組織分散成細胞團或單個細胞時，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細胞沉淀，進行細胞計數(shù)，并調(diào)整細胞密度至實驗所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞;骨髓;貼壁;
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