大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮分離自骨組織;股骨頭(caput femoris)呈圓形,約占一圓球的2/3,其上為關(guān)節(jié)軟骨所覆蓋,在其頂部微后有一小窩,稱(chēng)為股骨頭凹,為股骨頭韌帶附著處,股骨頭可由此獲得少量血供。股骨頭骨髓的微血管結(jié)構(gòu)為珊瑚狀,后毛細(xì)血管微動(dòng)脈與微靜脈部分膨大、迂曲、互相纏繞;骨微血管內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成了骨內(nèi)微血管的內(nèi)襯,與骨內(nèi)其他成分聯(lián)系密切,參與了許多骨的病理生理過(guò)程在骨吸收新骨的形成血管再生營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)骨內(nèi)代謝產(chǎn)物輸出及維持骨內(nèi)微環(huán)境平衡方面具有重要作用。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 骨 |
英文名稱(chēng) | Rat Femoral Head Microvascular Endothelial Cells | 貨號(hào) | A01X1681 |
培養(yǎng)信息:

包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、bFGF、IGF、VEGF、Heparin、Hydrocortisone、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-3代左右;2代以?xún)?nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%,Accutase
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證
產(chǎn)品信息:

英文名稱(chēng):Rat Femoral Head Microvascular Endothelial Cells
組織來(lái)源:骨
默認(rèn)種屬 大鼠
產(chǎn)品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡(jiǎn)介 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮采用混合膠原酶消化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè) 實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,細(xì)胞純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
細(xì)胞培養(yǎng)操作:

1. 細(xì)胞復(fù)蘇
運(yùn)輸與接收:細(xì)胞以液氮凍存形式運(yùn)輸,收到后立即用75%酒精噴灑消毒細(xì)胞瓶,置于超凈臺(tái)內(nèi)無(wú)菌操作。
復(fù)蘇操作:將細(xì)胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時(shí)穩(wěn)定狀態(tài),顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)和密度,記錄初始狀態(tài)(建議40x、100x、200x各拍一張照片)。
2. 細(xì)胞傳代
傳代時(shí)機(jī):當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)80%匯合度時(shí)進(jìn)行傳代。
操作步驟:
棄去舊培養(yǎng)基,用無(wú)鈣鎂PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液(1-2 mL),37℃孵育1-2分鐘,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化,輕輕吹打使細(xì)胞完全脫落。
離心(1000 RPM,5分鐘),棄上清,用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代(如T25瓶分至兩個(gè)T25瓶),補(bǔ)充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率:每2-3天換液一次。
3. 細(xì)胞凍存
凍存液:使用無(wú)血清凍存液。
凍存步驟:細(xì)胞傳代后,用胰蛋白酶消化并離心,重懸于凍存液,緩慢降溫至-80℃,最終轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期保存。
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核心特點(diǎn):
高度生理相關(guān)性:保留了體內(nèi)來(lái)源組織的結(jié)構(gòu)、功能和基因表達(dá)特征。
有限壽命:與無(wú)限增殖的腫瘤細(xì)胞系不同,原代細(xì)胞增殖能力有限,經(jīng)過(guò)一定次數(shù)的分裂后會(huì)進(jìn)入衰老期,這更符合正常細(xì)胞的生理狀態(tài)。
異質(zhì)性:初始培養(yǎng)物通常是多種細(xì)胞類(lèi)型的混合物,有時(shí)需要通過(guò)差速貼壁等方法進(jìn)行純化。
操作要求高:對(duì)培養(yǎng)環(huán)境、試劑質(zhì)量和無(wú)菌操作的要求極為嚴(yán)格,培養(yǎng)難度大于永生化細(xì)胞系。
關(guān)鍵字: 大鼠股骨頭微血管內(nèi)皮細(xì)胞;骨;貼壁;
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