大鼠牙齦上皮細(xì)胞
產(chǎn)品信息：
英文名稱 | Rat Gingival Epithelial Cells | 種屬 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 | 貨號 | A01X1744 |
組織來源 | 牙齦組織 | 生長特性 | 貼壁 |
細(xì)胞簡介：
大鼠牙齦上皮分離自牙齦組織；牙齦是附著在牙頸和牙槽突部分的粘膜組織，呈粉紅色、有光澤、質(zhì)堅(jiān)韌。牙齦邊緣稱為齦緣，正常呈月芽形。齦緣與牙頸之間的小溝稱齦溝。兩鄰牙之間的牙齦突起稱齦乳突。也叫齒齦，通稱牙床；是指包住齒頸的黏膜組織，粉紅色，內(nèi)有很多血管和神經(jīng)。牙齦上皮長期被認(rèn)為是抵御口腔中持續(xù)存在的細(xì)菌的被動免疫屏障，隨著對牙周致病菌的不斷認(rèn)識，發(fā)現(xiàn)牙齦上皮不僅僅是抵御微生物的物理屏障，上皮細(xì)胞還可以分泌抗菌多肽，參與先天性免疫。牙齦上皮作為牙周組織的道屏障，在抵御牙周炎細(xì)菌入侵的過程中發(fā)揮了重要作用，建立正常牙齦上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)體系，將為各種牙齦上皮相關(guān)的研究提供穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?/span>
方法簡介 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙齦上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測 公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠牙齦上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
關(guān)鍵操作技巧與注意事項(xiàng)：
成功的原代培養(yǎng)依賴于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)募?xì)節(jié)控制：
嚴(yán)格無菌操作：這是實(shí)驗(yàn)成功的基石。所有操作需在生物安全柜中進(jìn)行，試劑和耗材必須無菌。
保持靜置：細(xì)胞接種后的最初24-48小時內(nèi)，應(yīng)保持培養(yǎng)瓶絕對靜置，避免頻繁取出觀察或晃動，這有助于細(xì)胞貼壁和伸展。
優(yōu)化消化過程：
消化時間要恰到好處，過長會損傷細(xì)胞，過短則細(xì)胞分散不佳。
膠原酶對組織的損傷較小，常用于分離活性要求高的細(xì)胞；胰蛋白酶作用較強(qiáng)，需嚴(yán)格控制時間。
酶液應(yīng)新鮮配制，避免活性下降。
控制接種密度：原代細(xì)胞在低密度下不易存活，建議適當(dāng)提高初始接種密度，以保證細(xì)胞間的相互作用促進(jìn)其生長。
定期換液：根據(jù)培養(yǎng)基顏色變化（如變黃）或每隔2-3天更換一次培養(yǎng)液，以清除代謝廢物并補(bǔ)充營養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
人蛋白酪氨酸磷酸酶自身抗體PCR檢測試劑盒 | RNF187 環(huán)指蛋白187抗體 |
大鼠血漿谷胱甘肽過氧化物酶(GPX3)PCR檢測試劑盒 | 碳酸酐酶10抗體 |
小鼠骨鈣素/骨谷氨酸蛋白(OT/BGP)PCR檢測試劑盒 | 前列腺酸性磷酸酶抗體 |
大鼠谷光甘肽合成酶(GSS)PCR檢測試劑盒 | CIP2A/p90 Autoantigen 蛋白磷酸酶PP2A癌抑制蛋白抗體 |
細(xì)胞凍存液100ml | 輔酶Q10B抗體 |
G蛋白調(diào)節(jié)誘導(dǎo)神經(jīng)突增生蛋白2抗體 | FAM160B1 FAM160B1蛋白抗體 |
AARE 氧化蛋白質(zhì)水解酶 | 倉鼠白介素3(IL-3)PCR檢測試劑盒 |
PE標(biāo)記小鼠CD23單克隆抗體 | 前白蛋白PA試劑盒 R1：45ml×1 R2：15ml×1 免疫濁度法 |
胰島素受體抗體 | 小鼠血紅蛋白(HB)PCR檢測試劑盒 |
Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr740) 磷酸化血小板源性生長因子受體-B抗體 | 大鼠白介素1β(IL－1β)PCR檢測試劑盒 |
Cyclin Y 周期素Y/X抗體 | 人胃動素（MTL）PCR檢測試劑盒 |
小鼠抗表皮生長因子樣激素受體1（EMR1）單克隆抗體 | 猴胰島素樣生長因子1(IGF-1)核酸檢測試劑盒 |
SUMO1 類泛素蛋白1單克隆抗體 | 小鼠內(nèi)皮型一氧化氮合酶(eNOS)PCR檢測試劑盒 |
半胱胺酸蛋白酶-2抗體 | AFG3L2 AFG3樣蛋白2/脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)蛋白28抗體 |
大鼠滑膜成纖維細(xì)胞 | 大鼠牙齦上皮細(xì)胞Rat Skeletal Muscle Cells |
小鼠眼外肌成纖維細(xì)胞 | Mouse primary conjunctival sac fibroblasts |
細(xì)胞培養(yǎng)操作
消化培養(yǎng)法
此方法利用酶（如胰蛋白酶、膠原酶）將組織分散成單個細(xì)胞或細(xì)胞團(tuán)，形成細(xì)胞懸液進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞生長較快。
取材與剪切
同樣在無菌條件下獲取組織，并用Hanks液清洗干凈。
將組織剪切成更小的碎塊（約 1 mm3），以便酶更好地發(fā)揮作用。
酶消化
將組織塊轉(zhuǎn)移至容器中，加入適量的酶消化液（如0.25%胰蛋白酶）。
在 37℃ 條件下消化 20-40分鐘，期間可適當(dāng)搖動或吹打。消化程度需在顯微鏡下觀察，當(dāng)組織分散成細(xì)胞團(tuán)或單個細(xì)胞時，立即終止消化。
終止與洗滌
加入含血清的培養(yǎng)液以終止酶的消化作用（血清可抑制胰蛋白酶活性）。
將細(xì)胞懸液通過篩網(wǎng)過濾，除去未消化的組織塊。然后以 1000 rpm 離心 5-10分鐘，棄去上清液。
接種與培養(yǎng)
用適量新鮮培養(yǎng)液重懸細(xì)胞沉淀，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，并調(diào)整細(xì)胞密度至實(shí)驗(yàn)所需濃度（例如 5×10 cells/mL）。
將細(xì)胞懸液分裝至培養(yǎng)瓶中，放入 37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
關(guān)鍵字： 大鼠牙齦上皮細(xì)胞;牙齦組織;貼壁;
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